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倔强的柠檬片

新虫 (小有名气)

[求助] DNS法测定还原糖含量问题 已有1人参与

最近在做用DNS显色法测定还原糖含量的试验,如文献中所报道的先用浓硫酸将多糖水解,然后水浴加热2h,冷却后用碱中和,最后定容,与DNS反应,用紫外测定。但是试验结果总是不理想,是不是哪个程序操作不对,请熟悉的老师同学帮忙解决一下,万分感谢!
怀疑操作的点有:1 加入浓硫酸的时候是在冰水浴里缓慢加入,大约3s一滴,试管不会发热,是不是加浓硫酸的过程有误
2 加碱中和的时候也是在冰水浴里缓慢加入,但是由于所用碱浓度较大,会出现多加一滴或零点几毫升而调过,再加硫酸,如此反复,直到将pH调至中性,不知这样会不会有影响
3 在中和完定容后,防止一段时间,容量瓶底层会出现一层深褐色类似沉淀的东西,是不是水解过了?
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紫心冰涵

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 4115480017 at 2017-04-10 19:57:17
为什么要中和

DNS和还原糖反应要在碱性条件下。

发自小木虫IOS客户端
7楼2017-09-19 15:00:24
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sty5959596

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

DNS我这周也要做,对于你的过程不敢妄下结论。但是就第一条而言,加硫酸如果是为了让多糖水解的话,应该是迅速直接加入多糖液体中,而不应该冰浴缓慢加。希望能帮到你
3楼2015-11-16 10:14:38
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倔强的柠檬片

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by sty5959596 at 2015-11-16 10:14:38
DNS我这周也要做,对于你的过程不敢妄下结论。但是就第一条而言,加硫酸如果是为了让多糖水解的话,应该是迅速直接加入多糖液体中,而不应该冰浴缓慢加。希望能帮到你

迅速加入浓硫酸?希望你能成功

发自小木虫IOS客户端
4楼2015-11-17 23:31:00
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sty5959596

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 倔强的柠檬片 at 2015-11-17 23:31:00
迅速加入浓硫酸?希望你能成功
...

是的,迅速加入!

发自小木虫IOS客户端
5楼2015-11-17 23:31:34
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