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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 请大家帮帮忙，看看这几板胶跑的出了什么问题
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新虫 (初入文坛)

[交流] 请大家帮帮忙，看看这几板胶跑的出了什么问题 已有9人参与

大家好，本人新手刚做实验不久，筛了一批多态性引物，现在在跑群体的DNA，前两张图片跑得很好了没有问题读带非常清楚。

不知道为什么接下来两天跑的两次（如后面4图），会跑成这样。请大家帮我分析下

因为这几次都是连着跑的，不知道怎么突然出现这种问题的。
我自己的猜测是，1.因为我的群体DNA稀释完以后是放到-20℃的冰柜中的，每次做PCR都是拿出来用完再放回去，不知道这样反复冻融几次是不是就降解了，一共拿出拿进这样5次左右。

2.染胶的时候刚开始我看胶变浅黄色点样口的底部会有明显的条带，染完后就成这样了，不知道是不是没跑下来的问题。。但是跑胶的时候是看到往下走的。这个不太懂。

3.操作的问题的话，每次都是一样的，PCR的体系也一样的，酶是最后加，loadingbuffer加的也是一样的，染胶显色的东西都是固定不变的。

然后想不出来什么条理清晰的问题了，具体问题请大家帮我分析看好么。最后由于我是刚注册的号都发不了帖，这个账号还是借的同学的只有3个金币，没法悬赏了对不住

前两张图是第一次做成功的，3,4图是第二次，5,6图是刚刚做的。

请大家帮帮忙，看看这几板胶跑的出了什么问题
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请大家帮帮忙，看看这几板胶跑的出了什么问题-1
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请大家帮帮忙，看看这几板胶跑的出了什么问题-2
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请大家帮帮忙，看看这几板胶跑的出了什么问题-3
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请大家帮帮忙，看看这几板胶跑的出了什么问题-4
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请大家帮帮忙，看看这几板胶跑的出了什么问题-5
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1楼 2015-09-20 15:16:02
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穿白大褂约会

禁言 (小有名气)
★
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6楼2015-09-22 14:34:11
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反应链

新虫 (正式写手)
★
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这是不是胶有问题啊？
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2楼2015-09-21 15:02:53
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铁树开花

捐助贵宾 (小有名气)

纳米磁珠 试剂盒 体外诊断
★
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看看胶和缓冲液是不是和第一次的不一样

发自小木虫Android客户端
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http://www.lnjnbio.com/
5楼2015-09-22 12:48:44
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静默静默

新虫 (小有名气)
★
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我们以前跑胶的时候也遇到过类似的现象 那时候是AgNO3或者显影液 或者引物的问题。。
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7楼2015-09-22 15:16:53
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