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[求助]
急急急！！！关于pcr引物设计 已有5人参与
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我要扩增下面的序列 atgaaat ctaaactttt gattacttca ttattagtag gcgctattat 281281 aattggagga tgtagtgcgg gtaattcgga atctaataat aattcaaata tggaccattc 281341 taatatgtct ggtatggacc attccaatat gagtgatgaa gaaatgaaaa acatggaggg 281401 tatggataat aaagatagta gcatggaaaa tggtcatgcg agtcataaca atccattagc 281461 attaaataat tcaaatgggg aaaatgagct tgcgctccca cctattattg aacctaaaaa 281521 tggaattgtt gatattactg ctcaacaagg aacaacagaa atctttaagg gaactaaaac 281581 agagacatat ggatataatg gttccttttt agggccaatc attcgtatta ataaagatca 281641 aacggtaacg tttagaacta aaaatgattt atctgaacca acaacatttc actggcatgg 281701 attagaaatc cctggaaatg gtgatggcgg cccacatcaa gtcctagagc caggtgtaac 281761 agaagatgta aattttacag ttaatcaggg agcatctacg ctgtggttcc atccacatcc 281821 agaaggtgct acagcagagc aagtatataa aggtttagct ggtttaattt atatagatga 281881 tgaaaactca caagaaatca atgtaccaaa tgaatatggt gtgaatgatt ttccattagt 281941 attccaagat agacaattta ctgaagaaaa gcaattaaat tatcaagcag tccttaatga 282001 agatggtaca attggagata ctttattaat taatggtacg ttgaatccta aacttacagt 282061 tggtaaagaa aaagtaagac ttcgtttatt aaacggttct aatgctcgta attatacttt 282121 taaattgaat accggagata cattccaaca aattgctact gatggtggtt tcttaaatca 282181 accaactgat atgaaagaaa ttaccttaac accaggtgag cgagcagagg taatagtgga 282241 cttttcaaaa atggatgaca agactgatat agcattaata aatgatgaag gtactaccct 282301 tttaccattt aaaattgaac aaaagactac aagtacaagt aaaatttcag aaaaattaaa 282361 tgattttagt gttactgaag aagagaaaaa tttaccagtt tctaagaagc ttgaactatt 282421 tggtatgggg acaatggttt ctataaatgg aaaccagttt gatatgaatc gcattgattt 282481 cactcaaaag cagggtgaga ctgaaatttg ggaaatttat aataaacctg atatgatggg 282541 tggtatgaca catcctttcc acatacatgg cactcaattt aaaatcgtgt cgattgatgg 282601 tcaagaacct cctttaaatt taaaagggtg gaaggatact gtctcaattg aagctggtca 282661 aacagttaaa ttagcagtga agtttaataa taagggcata tacatgttcc actgccatgt 282721 ccttgaacat gaagaaaatg gtatgatggg gcaagttgaa gtaaattaa 设计的引物 上游 5’ atgaaatctaaacttttg 3’ 下游 5’ ttaatttacttcaacaac 3’ 感觉连续相同的碱基太多，pcr结果只有二聚体。哪位大神能帮我设计一下，急求！ |
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4楼2015-09-18 15:19:51
2楼2015-09-18 11:21:44
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西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2015-09-18 22:29:53
西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2015-09-18 22:29:53
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Forward primer GTGCCTATGTAAAGAATAAAAGGAG Reverse primer TTAATATGAACCACGACCAA Product length 1672 NCBI数据库上的比对结果如下：http://www.ncbi.nlm.nih.gov/tool ... p;CheckStatus=Check |
3楼2015-09-18 13:28:36
5楼2015-09-18 15:34:06
6楼2015-09-18 15:34:15
7楼2015-09-18 16:18:23
【答案】应助回帖
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西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2015-09-18 22:30:18
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2015-09-18 22:30:18
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另外扩增全长要求特异性高，需要引物长度26+你这引物太短了，设引物前先查查资料…做科研当伸手党可不好，再试试吧 发自小木虫Android客户端 |
8楼2015-09-18 16:20:06
9楼2015-09-18 18:17:48
10楼2015-09-18 18:22:29