24小时热门版块排行榜    

查看: 1132  |  回复: 14
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

hoajie

银虫 (初入文坛)

[求助] 急急急!!!关于pcr引物设计 已有5人参与

我要扩增下面的序列
            atgaaat ctaaactttt gattacttca ttattagtag gcgctattat
   281281 aattggagga tgtagtgcgg gtaattcgga atctaataat aattcaaata tggaccattc
   281341 taatatgtct ggtatggacc attccaatat gagtgatgaa gaaatgaaaa acatggaggg
   281401 tatggataat aaagatagta gcatggaaaa tggtcatgcg agtcataaca atccattagc
   281461 attaaataat tcaaatgggg aaaatgagct tgcgctccca cctattattg aacctaaaaa
   281521 tggaattgtt gatattactg ctcaacaagg aacaacagaa atctttaagg gaactaaaac
   281581 agagacatat ggatataatg gttccttttt agggccaatc attcgtatta ataaagatca
   281641 aacggtaacg tttagaacta aaaatgattt atctgaacca acaacatttc actggcatgg
   281701 attagaaatc cctggaaatg gtgatggcgg cccacatcaa gtcctagagc caggtgtaac
   281761 agaagatgta aattttacag ttaatcaggg agcatctacg ctgtggttcc atccacatcc
   281821 agaaggtgct acagcagagc aagtatataa aggtttagct ggtttaattt atatagatga
   281881 tgaaaactca caagaaatca atgtaccaaa tgaatatggt gtgaatgatt ttccattagt
   281941 attccaagat agacaattta ctgaagaaaa gcaattaaat tatcaagcag tccttaatga
   282001 agatggtaca attggagata ctttattaat taatggtacg ttgaatccta aacttacagt
   282061 tggtaaagaa aaagtaagac ttcgtttatt aaacggttct aatgctcgta attatacttt
   282121 taaattgaat accggagata cattccaaca aattgctact gatggtggtt tcttaaatca
   282181 accaactgat atgaaagaaa ttaccttaac accaggtgag cgagcagagg taatagtgga
   282241 cttttcaaaa atggatgaca agactgatat agcattaata aatgatgaag gtactaccct
   282301 tttaccattt aaaattgaac aaaagactac aagtacaagt aaaatttcag aaaaattaaa
   282361 tgattttagt gttactgaag aagagaaaaa tttaccagtt tctaagaagc ttgaactatt
   282421 tggtatgggg acaatggttt ctataaatgg aaaccagttt gatatgaatc gcattgattt
   282481 cactcaaaag cagggtgaga ctgaaatttg ggaaatttat aataaacctg atatgatggg
   282541 tggtatgaca catcctttcc acatacatgg cactcaattt aaaatcgtgt cgattgatgg
   282601 tcaagaacct cctttaaatt taaaagggtg gaaggatact gtctcaattg aagctggtca
   282661 aacagttaaa ttagcagtga agtttaataa taagggcata tacatgttcc actgccatgt
   282721 ccttgaacat gaagaaaatg gtatgatggg gcaagttgaa gtaaattaa
  
设计的引物
上游  5’ atgaaatctaaacttttg 3’
下游  5’ ttaatttacttcaacaac 3’

感觉连续相同的碱基太多,pcr结果只有二聚体。哪位大神能帮我设计一下,急求!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wx3280065

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我去,你这gc含量估计不到20%不行加gc含量多的酶切位点和保护碱基吧。

发自小木虫Android客户端
7楼2015-09-18 16:18:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wx3280065

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2015-09-18 22:30:18
另外扩增全长要求特异性高,需要引物长度26+你这引物太短了,设引物前先查查资料…做科研当伸手党可不好,再试试吧

发自小木虫Android客户端
8楼2015-09-18 16:20:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 hoajie 的主题更新
信息提示
请填处理意见