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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 奇怪HPLC色谱峰
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kobe24song

金虫 (正式写手)

[交流] 奇怪HPLC色谱峰

C18柱，进了一针甲醇植物粗提取物后，0.5mg/ml甲醇溶液，进样1μl。出现下列问题：
1. 长时间洗柱子没峰，甲醇、乙腈都洗过。
2. 每进一针空针或者甲醇，怪事就出现了。不管是用甲醇还是乙腈做有机相，有机相比例增加时都会出现下面图片上的峰，14-30min之间。
并且，不管你进多少次空针或者甲醇都会在那个时间点那个强度出来。如果用纯有机相洗，洗一段时间就没有，等你下次进空针时，又有。
3. 之前用这个柱子分析过其他样品，没有这些情况出现。请大家帮忙分析一下，多谢！

奇怪HPLC色谱峰
1.jpg


奇怪HPLC色谱峰-1
2.jpg


奇怪HPLC色谱峰-2
3.jpg


奇怪HPLC色谱峰-3
4.jpg
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1楼 2015-09-17 15:49:30
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kobe24song

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 18944605597 at 2015-09-17 15:54:20
什么检测器？

紫外210nm
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9楼2015-09-17 16:06:41
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kobe24song

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by KIBPhyto at 2015-09-17 15:58:01
样品是不是极性小或者溶解度不好，建议适当处理样品或选择合适的分析条件

溶解度很好。
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10楼2015-09-17 16:07:05
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kobe24song

金虫 (正式写手)
引用回帖:
12楼: Originally posted by 18944605597 at 2015-09-17 17:57:07
可能样品太杂了吧

确实很杂
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15楼2015-09-18 10:10:55
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kobe24song

金虫 (正式写手)
引用回帖:
14楼: Originally posted by shidengxmc at 2015-09-18 07:59:33
换个柱子试试

准备换一根看看
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16楼2015-09-18 10:11:32
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kobe24song

金虫 (正式写手)
引用回帖:
19楼: Originally posted by 崇明先生 at 2015-09-18 20:59:21
很有可能是你的进样阀或者定量环被污染了。另外，你可以试试其他的检测波长，210纳米的检测波长基线不稳也是比较正常的。

谢谢，很可能是你说的原因
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20楼2015-09-18 21:27:17
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kobe24song

金虫 (正式写手)
引用回帖:
28楼: Originally posted by raulsam1984 at 2015-09-20 09:06:22
楼主，你的检测波长太接近甲醇的末端吸收了，会不会是这样影响呢？而且会不会是你梯度洗脱的时候变化太快呢？如果你说这根色谱柱检测其它样品没有问题的话，那可能就是以上的问题了。祝楼主早日解决问题。

有可能，感谢回复！
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29楼2015-09-20 14:28:40
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