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805343404

新虫 (小有名气)

[求助] western blot只有maker,没有条带是怎么回事? 已有1人参与

做一维蛋白凝胶电泳免疫印迹,转到PVDF膜上后除了maker什么都没有,一抗稀释倍数1:300,二抗1:5000.  4个月前做过倒是有条带的,但是最近做了好多遍都没有出现条带,之前纯化的一抗一直在-20保存,不知道是不是 抗体的原因,希望各位同行们帮帮我这个菜鸟,求急,谢谢大家了!
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kuaile5420

专家顾问 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
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805343404: 金币+5 2015-09-06 14:12:51
自己制作的一抗,这是第一次使用吗?之前自己有做测试吗?抗体效果怎么样?
坚持到底就是胜利!
2楼2015-09-05 14:26:58
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805343404

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by kuaile5420 at 2015-09-05 14:26:58
自己制作的一抗,这是第一次使用吗?之前自己有做测试吗?抗体效果怎么样?

是自己做的,之前做过转膜,没问题的,昨天做的转膜出来了,就是膜上的蛋白条带很不清楚,只是模糊的一个竖条,是因为蛋白上样量少吗
3楼2015-09-06 09:43:58
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穿白大褂约会

禁言 (小有名气)


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-09-07 22:40:03
本帖内容被屏蔽

4楼2015-09-07 21:50:07
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