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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » western blot只有maker,没有条带是怎么回事？
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805343404

新虫 (小有名气)

[求助] western blot只有maker,没有条带是怎么回事？ 已有1人参与

做一维蛋白凝胶电泳免疫印迹，转到PVDF膜上后除了maker什么都没有，一抗稀释倍数1：300，二抗1：5000.  4个月前做过倒是有条带的，但是最近做了好多遍都没有出现条带，之前纯化的一抗一直在-20保存，不知道是不是 抗体的原因，希望各位同行们帮帮我这个菜鸟，求急，谢谢大家了!
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1楼 2015-09-05 14:22:42
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kuaile5420

专家顾问 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
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805343404: 金币+5 2015-09-06 14:12:51
自己制作的一抗，这是第一次使用吗？之前自己有做测试吗？抗体效果怎么样？
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坚持到底就是胜利！
2楼2015-09-05 14:26:58
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805343404

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by kuaile5420 at 2015-09-05 14:26:58
自己制作的一抗，这是第一次使用吗？之前自己有做测试吗？抗体效果怎么样？

是自己做的，之前做过转膜，没问题的，昨天做的转膜出来了，就是膜上的蛋白条带很不清楚，只是模糊的一个竖条，是因为蛋白上样量少吗
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3楼2015-09-06 09:43:58
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穿白大褂约会

禁言 (小有名气)
★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-09-07 22:40:03
本帖内容被屏蔽
4楼2015-09-07 21:50:07
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