【答案】应助回帖

11楼2015-08-31 12:28:06

穿白大褂约会

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12楼2015-09-01 13:55:31

穿白大褂约会

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王栋

13楼2015-09-01 13:59:18

masterfan359

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【答案】应助回帖

引用回帖:

10楼: Originally posted by lingonghua at 2015-08-31 12:18:25
y引物不太匹配或降解，我们实验室学生也遇到过类似情况，重新合成引物试试

的确会存在这样的情况，引物放久了导致PCR扩增失败

14楼2015-09-01 16:30:11

ufo29119690

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应该是后来提取的DNA质量不好有降解或者浓度低

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15楼2015-09-02 06:33:28

327351493

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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-09-05 23:01:58

重新换一批新的引物，酶等，用第一次P的条件进行，如果能P出来，可能就是这些物质降解了，如果没P出来，可能是模板出问题了

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16楼2015-09-02 07:43:13

vivd娟

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【答案】应助回帖

感觉是模板的问题，降解了

17楼2015-09-02 10:53:30

xiaoyanzi517

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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-09-05 23:02:15

可从两个方面找原因：
1.DNA换试剂盒提取试试
2.引物从干粉或原液重新稀释，用新鲜的工作液做PCR

偶时晴天偶时雨

18楼2015-09-02 12:51:10

枭翔

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西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2015-09-05 23:01:24

首先，看看你的模板DNA，跑个电泳看看，是不是降解。最好是重新提取一次。引物一般没啥问题，可以最后考虑。扩增体系里面加上5-10%的DMSO。可以用你第一次的产物作为模板进行扩增，这样万无一失，如果还是不行，说明你的酶可能失活了。

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19楼2015-09-02 13:44:41

王栋

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引用回帖:

10楼: Originally posted by lingonghua at 2015-08-31 12:18:25
y引物不太匹配或降解，我们实验室学生也遇到过类似情况，重新合成引物试试

谢谢前辈~最近重新提了DNA,发现是因为之前提DNA没有除RNA的原因。但是PCR产物浓度不高，该怎么解决呢？谢谢前辈~

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20楼2015-09-03 22:41:27