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基因组DNA为模板进行PCR，第一次扩出来了，后面怎么重复都不行。已有12人参与
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提取秀丽线虫基因组DNA，以此为模板进行PCR扩增，目的片段2300bp。使用Q5 高保真DNA聚合酶，25ul体系（7.25ul H2O＋5ul 5×buffer＋2ul 2.5mM dNTP＋1.25ul上游引物＋1.25ul下游引物＋3ul 模板＋5ul GC Enhancer＋0.25ul Q5酶）。第一次扩增成功，但是之后模板用没了又重新提了3次基因组DNA，始终不能扩增出目的片段，退火温度从50度到72度都试过了，不行，Taq酶也试过了，不行。 第一次扩增成功（最上面那条带） .jpg  最初使用的条件.png  后来的结果就一直是这样的.png |
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-09-05 23:01:58
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-09-05 23:01:58
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重新换一批新的引物，酶等，用第一次P的条件进行，如果能P出来，可能就是这些物质降解了，如果没P出来，可能是模板出问题了 发自小木虫Android客户端 |
16楼2015-09-02 07:43:13
2楼2015-08-28 11:35:16
3楼2015-08-28 11:55:05
4楼2015-08-28 12:08:22