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基因组DNA为模板进行PCR，第一次扩出来了，后面怎么重复都不行。已有12人参与
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提取秀丽线虫基因组DNA，以此为模板进行PCR扩增，目的片段2300bp。使用Q5 高保真DNA聚合酶，25ul体系（7.25ul H2O＋5ul 5×buffer＋2ul 2.5mM dNTP＋1.25ul上游引物＋1.25ul下游引物＋3ul 模板＋5ul GC Enhancer＋0.25ul Q5酶）。第一次扩增成功，但是之后模板用没了又重新提了3次基因组DNA，始终不能扩增出目的片段，退火温度从50度到72度都试过了，不行，Taq酶也试过了，不行。 第一次扩增成功（最上面那条带） .jpg  最初使用的条件.png  后来的结果就一直是这样的.png |
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17楼2015-09-02 10:53:30