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呦呦奶茶

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助求助,PCR电泳跑成这样,是什么原因呢。新手刚开始做。marker也看不出来。 已有9人参与

求助求助,PCR电泳跑成这样,是什么原因呢。新手刚开始做。marker也看不出来。求指教!!

求助求助,PCR电泳跑成这样,是什么原因呢。新手刚开始做。marker也看不出来。
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lcuwxy

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
27楼: Originally posted by cynlicious at 2015-09-07 21:25:35
你好,想请教一个问题:我刚做了跑胶,marker看不出来。我的胶是这样配置的:1%的琼脂糖凝胶,微波炉加热。之后加入6微升的gengreen核酸燃料。
首先我的TBE溶液时刚买的,溶解琼脂糖的时候也完全溶解了,就是那个 ...

具体怎么样我也不敢断定,你可以自己分析下,如果可以看见条带,只是marker 看不见,有可能是marker失效了,如果你所有条带都很模糊,就有可能是你的genegreen 失效。
28楼2015-09-07 22:08:06
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晞朔

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
请给出你的反应程序和反应体系
4楼2015-08-25 14:41:39
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肥猫p

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-08-25 22:43:54
marker看不出来,说明肯定是胶的问题。你融化琼脂糖的时候,试试延长一点加热时间,比如微波炉1min
5楼2015-08-25 20:55:06
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呦呦奶茶

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 晞朔 at 2015-08-25 14:41:39
请给出你的反应程序和反应体系

体系是Mix12.5,引物各0.5微升,DNA模板1微升,最后定容到25微升,
反应过程我这个是94度5分钟,94度一分钟,退火温度是从56到62跑了个梯度,然后72度一分钟,35个循环,最后72度跑五分钟。
胶是2%的,电压80V非常感谢!!!

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
6楼2015-08-26 00:13:44
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