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呦呦奶茶

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助求助，PCR电泳跑成这样，是什么原因呢。新手刚开始做。marker也看不出来。 已有9人参与

求助求助，PCR电泳跑成这样，是什么原因呢。新手刚开始做。marker也看不出来。求指教！！

求助求助，PCR电泳跑成这样，是什么原因呢。新手刚开始做。marker也看不出来。
IMG_1252.JPG
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1楼 2015-08-25 10:20:14
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cynlicious

新虫 (小有名气)
引用回帖:
25楼: Originally posted by lcuwxy at 2015-08-26 22:37:36
你加了marker？哪条带是？如果加了marker也是这样子，就应该是跑胶的问题了。重新跑一下试试吧。另外提醒你一下，循环数不是越多越好的，我们试过循环数30和25，在我们P的那个基因以及条件下，25个循环甚至20个循环 ...

你好，想请教一个问题：我刚做了跑胶，marker看不出来。我的胶是这样配置的：1%的琼脂糖凝胶，微波炉加热。之后加入6微升的gengreen核酸燃料。
首先我的TBE溶液时刚买的，溶解琼脂糖的时候也完全溶解了，就是那个gengreen和marker，那个放了快一年的时间，不知道是不是因为过期失效了。
非常感谢
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气顺，心顺，事顺。不要有功利心，耶！
27楼2015-09-07 21:25:35
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晞朔

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
请给出你的反应程序和反应体系
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4楼2015-08-25 14:41:39
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肥猫p

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-08-25 22:43:54
marker看不出来，说明肯定是胶的问题。你融化琼脂糖的时候，试试延长一点加热时间，比如微波炉1min
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5楼2015-08-25 20:55:06
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呦呦奶茶

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 晞朔 at 2015-08-25 14:41:39
请给出你的反应程序和反应体系

体系是Mix12.5，引物各0.5微升，DNA模板1微升，最后定容到25微升，
反应过程我这个是94度5分钟，94度一分钟，退火温度是从56到62跑了个梯度，然后72度一分钟，35个循环，最后72度跑五分钟。
胶是2%的，电压80V非常感谢！！！

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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6楼2015-08-26 00:13:44
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