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xrxleisure

铜虫 (正式写手)

[求助] 求助!HRM PCR基因分型问题 已有1人参与

最近在做HRM PCR基因分型,但在PCR扩增的过程中出现了各种问题,有做过HRM PCR的吗,能否交流一下经验?在此不胜感激!
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xrxleisure

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 许彦 at 2015-08-25 10:50:57
那你做的hrm有区别吗?ct值大概查多少,有没有试试换不同的孔做做,有没有做提取一个核酸的重复(有没有复孔)
...

有差别啊,差别还挺大,ct值大约都在25左右,没有做复孔,就质粒做了两次重复,结果不太好,能不能详细的给我说一下你们都是怎样做HRM PCR的,每个样本都做重复吗?
9楼2015-08-25 11:25:21
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ptttmt

银虫 (正式写手)

具体说说都出现了啥情况

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2015-08-21 15:31:32
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xrxleisure

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by ptttmt at 2015-08-21 15:31:32
具体说说都出现了啥情况

就是质粒做的两个重复,重复样本间的差异很大,还有就是相同的基因位点,不同的样本,扩增曲线差异也很大,有时候扩增的曲线很不好,PCR条件都是相同的,PCR仪也是同一台,刚接触HRM PCR,很多操作过程可能都不是很规范,能不能细讲一下。谢谢了!
3楼2015-08-24 08:33:39
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许彦

木虫 (正式写手)

首先你用的什么pcr仪器,
同一个样本重复差异有很多,但是tm值应该是不会有变化的。

[ 发自小木虫客户端 ]
4楼2015-08-24 10:01:24
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