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求助!HRM PCR基因分型问题
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xrxleisure
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求助!HRM PCR基因分型问题
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最近在做HRM PCR基因分型,但在PCR扩增的过程中出现了各种问题,有做过HRM PCR的吗,能否交流一下经验?在此不胜感激!
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1楼
2015-08-21 15:05:49
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许彦
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Originally posted by
xrxleisure
at 2015-08-25 08:45:44
用的是Rotor-Gene Q PCR仪,因为做的样本量较大,做了野生型,纯合型,杂合型的质粒分别做了两组,同样都是野生型的两个曲线,两个相比,其中一个明显滞后了,两组质粒相比的话,另一组质粒的扩增曲线都滞后于第一 ...
那你做的hrm有区别吗?ct值大概查多少,有没有试试换不同的孔做做,有没有做提取一个核酸的重复(有没有复孔)
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8楼
2015-08-25 10:50:57
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具体说说都出现了啥情况
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2楼
2015-08-21 15:31:32
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2楼
:
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ptttmt
at 2015-08-21 15:31:32
具体说说都出现了啥情况
就是质粒做的两个重复,重复样本间的差异很大,还有就是相同的基因位点,不同的样本,扩增曲线差异也很大,有时候扩增的曲线很不好,PCR条件都是相同的,PCR仪也是同一台,刚接触HRM PCR,很多操作过程可能都不是很规范,能不能细讲一下。谢谢了!
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3楼
2015-08-24 08:33:39
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首先你用的什么pcr仪器,
同一个样本重复差异有很多,但是tm值应该是不会有变化的。
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4楼
2015-08-24 10:01:24
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