应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 用Tagman探针进行分型，请问对所提取的DNA的浓度有要求么？
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
101/1返回列表
查看: 1614  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

happyllong

新虫 (初入文坛)

[交流] 用Tagman探针进行分型，请问对所提取的DNA的浓度有要求么？ 已有2人参与

听师兄说好像是不能超过200ng/μl还是多少的？我想问这DNAde浓度不是越高越容易PCR，然后方便分型么？
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2015-08-20 22:40:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我是鱼豆腐

金虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-08-22 23:04:18
不是啊，我们都把DNA浓度稀释到10ng每微升左右的
赞一下 回复此楼
2楼2015-08-22 10:03:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

happyllong

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 我是鱼豆腐 at 2015-08-22 10:03:03
不是啊，我们都把DNA浓度稀释到10ng每微升左右的

那你们是直接用缓冲液来稀释的么？还有你们用什么来检测浓度的，我们是用NANADROP微量紫外分光光度计来直接测的，感觉结果好不稳定啊，同一个样本几次的结果不太一样。
赞一下 回复此楼
3楼2015-08-22 22:24:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我是鱼豆腐

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by happyllong at 2015-08-22 22:24:09
那你们是直接用缓冲液来稀释的么？还有你们用什么来检测浓度的，我们是用NANADROP微量紫外分光光度计来直接测的，感觉结果好不稳定啊，同一个样本几次的结果不太一样。...

额，我是用1XTE稀释的，检测跟你们用的一样的，但是我每个样检测前用手指轻弹一下，然后测三次同一个样，这样就比较准了

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
4楼2015-08-22 22:34:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

caoyuan2007

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
Taqman探针对野生型和突变型进行分型，是有浓度比例的，如果其中一种浓度达到一定程度，会有扩增的。
赞一下 回复此楼
loveitwhenweshare
5楼2015-08-23 08:27:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

happyllong

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 我是鱼豆腐 at 2015-08-22 22:34:52
额，我是用1XTE稀释的，检测跟你们用的一样的，但是我每个样检测前用手指轻弹一下，然后测三次同一个样，这样就比较准了
...

你TE是另外买的么？我试剂盒里只有TB，都说TE比TB保存DNA好，我不知道有没有换TE的必要。那你加TE稀释是直接往里面加所需的TE量就可以了么，加完不用再水浴了吧，因为DNA已经都溶解了。
赞一下 回复此楼
6楼2015-08-24 10:07:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

happyllong

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 我是鱼豆腐 at 2015-08-22 22:34:52
额，我是用1XTE稀释的，检测跟你们用的一样的，但是我每个样检测前用手指轻弹一下，然后测三次同一个样，这样就比较准了
...

我听师兄说浓度太低了不好保存，所以一般浓度不是很高就不稀释。不知道你们稀释到10ng微升的保存效果怎么样？
赞一下 回复此楼
7楼2015-08-24 10:11:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我是鱼豆腐

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
6楼: Originally posted by happyllong at 2015-08-24 10:07:40
你TE是另外买的么？我试剂盒里只有TB，都说TE比TB保存DNA好，我不知道有没有换TE的必要。那你加TE稀释是直接往里面加所需的TE量就可以了么，加完不用再水浴了吧，因为DNA已经都溶解了。...

长期使用和保存还是用TE好些，我的TE都是我自己配的你敢信...不过灭菌了，我一般提出来DNA后统一每个都加50微升的TE，然后溶解后去测dna浓度，根据浓度大小最后再用灭菌水进行稀释成工作液（我一般样品都是几百ng每微升，所以我一般稀释就是吸10微升dna，再加100微升灭菌水，这样就基本都在10~100ng每微升以内了）。
   加完TE还是要溶解的，70度5min很快的，我用的是金属浴，总之溶解了就行了。
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2015-08-24 13:39:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我是鱼豆腐

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by happyllong at 2015-08-24 10:11:35
我听师兄说浓度太低了不好保存，所以一般浓度不是很高就不稀释。不知道你们稀释到10ng微升的保存效果怎么样？...

原样你可以放在-20度冰箱里，但是你该用的时候还是要用啊，所以我就用我准备好的稀释液，而且我感觉10~100ng每微升的样用一个月应该没问题的。
赞一下(1人) 回复此楼
9楼2015-08-24 13:42:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

happyllong

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 我是鱼豆腐 at 2015-08-24 13:39:01
长期使用和保存还是用TE好些，我的TE都是我自己配的你敢信...不过灭菌了，我一般提出来DNA后统一每个都加50微升的TE，然后溶解后去测dna浓度，根据浓度大小最后再用灭菌水进行稀释成工作液（我一般样品都是几百ng每 ...

谢谢你的回复
回复此楼
10楼2015-08-25 12:02:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 happyllong 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 269专硕求调剂 +9 金恩贝 2026-03-21 9/450 2026-03-27 11:25 by 王笑宇一定是研�
[考研] 085600，材料与化工321分调剂 +3 大馋小子 2026-03-27 4/200 2026-03-27 10:43 by guoweigw
[考研] 材料学硕333求调剂 +8 北道巷 2026-03-24 8/400 2026-03-27 10:18 by 我是小康
[考研] 276求调剂。有半年电池和半年高分子实习经历 +10 材料学257求调剂 2026-03-23 11/550 2026-03-27 10:13 by YCIT- LHL
[考研] 安徽大学专硕生物与医药专业(086000)324分，英语已过四六级，六级521，求调剂 +3 美味可乐鸡翅 2026-03-26 3/150 2026-03-27 08:46 by hxsm
[考研] 303求调剂 +7 元夕元 2026-03-20 8/400 2026-03-26 20:38 by 不吃魚的貓
[考研] 291求调剂 +9 hhhhxn.. 2026-03-23 9/450 2026-03-26 18:59 by 不吃魚的貓
[考研] 学硕274求调剂 +3 Li李鱼 2026-03-26 3/150 2026-03-26 18:32 by 提出方法的提出�
[考研] 279 分 求调剂 +3 睡个好觉_16 2026-03-24 3/150 2026-03-26 15:43 by zzll406
[考研] 总分293求调剂 +6 加一一九 2026-03-25 8/400 2026-03-26 13:30 by yujianx
[考研] 材料调剂 +3 iwinso 2026-03-23 3/150 2026-03-25 11:29 by greychen00
[考研] 085404电子信息284分求调剂 +4 13659058978 2026-03-24 4/200 2026-03-24 12:15 by syl20081243
[考研] 一志愿国科过程所081700，274求调剂 +3 三水研0水立方 2026-03-23 3/150 2026-03-23 23:11 by MajorWen
[考研] 328求调剂 +4 LHHL66 2026-03-23 4/200 2026-03-23 14:55 by lbsjt
[考研] 求老师收我 +3 zzh16938784 2026-03-23 3/150 2026-03-23 12:56 by ztnimte
[考研] 一志愿070300浙大化学358分，求调剂！ +4 酥酥鱼.. 2026-03-21 4/200 2026-03-23 08:12 by Iveryant
[考研] 一志愿东华大学化学070300，求调剂 +7 2117205181 2026-03-21 8/400 2026-03-22 22:55 by chixmc
[考研] 生物学调剂 +5 Surekei 2026-03-21 5/250 2026-03-22 14:39 by tcx007
[考研] 求调剂 +3 13341 2026-03-20 3/150 2026-03-21 18:28 by 学员8dgXkO
[考研] 336求调剂 +5 rmc8866 2026-03-21 5/250 2026-03-21 17:24 by 学员8dgXkO
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭