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细菌素离子层析挂柱 已有1人参与
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请教大家,我在做细菌素(戊糖片球菌,硫酸铵沉淀透析,冻干,用bufferA复溶上样,静置孵育1h)的离子层析,用的是阳离子,填料是SP Sepharose Flow Fast,最先用的缓冲液:bufferA是pH6.8 20mM的PB,bufferB是pH6.8 20mM的PB+1M NaCl,但是在用bufferA洗脱时出现了一个很高的峰,后面都没有峰。后面将缓冲液的pH分别调至6.3、5.8、5.3(浓度均为20mM),情况一样,又调整缓冲液浓度,分别为10mM、2mM(pH均为6.8),情况还是一样,不知道怎么会这样。 后面又看了文献,直接用上清液做了一次(担心会不会是硫酸铵没除干净),用10mM冰醋酸平衡,bufferA是pH6.8 20mM的PB,bufferB是0.1M NaCl,1M NaCl,做出来还是不理想。[img][/img](上清液做的图片,ps:因为资源有限,所以手动做的) 请教大家,万分感谢! 新人,第一次发帖,有什么不对的,多多原谅 |
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本内容由用户自主发布,如果其内容涉及到知识产权问题,其责任在于用户本人,如对版权有异议,请联系邮箱:xiaomuchong@tal.com - 附件 1 : 8.12上清液层析.xls
2015-08-13 09:27:19, 11.5 K
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