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scmyjzq

新虫 (初入文坛)

[求助] 求SDS-PAGE测定4KD的蛋白质,浓缩胶和分离胶配制 已有3人参与

请求各位大侠,我刚到学校,老师就安排我鉴定一个4KD的蛋白,由于分子量太小了,而且此蛋白含量极少,所以难度系数有点大,我不知道配胶比例,而且本人重来没做过蛋白这块,所以希望大家能帮忙提建议,在下感激不尽,重金悬赏
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ghqiu09

禁虫 (正式写手)


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-08-12 23:21:24
本帖内容被屏蔽

2楼2015-08-09 19:17:57
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673643401

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-08-12 23:21:42
4KD真的是太小了 检测难度很大 建议加个标签便于检测
3楼2015-08-10 09:07:46
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scmyjzq

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 673643401 at 2015-08-10 09:07:46
4KD真的是太小了 检测难度很大 建议加个标签便于检测

谢谢你哈,我这个蛋白是添加了His标签的,所以我要用镍柱纯化,可困难了,可是这跟跑胶有什么关系呢?
4楼2015-08-12 20:46:44
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scmyjzq

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by ghqiu09 at 2015-08-09 19:17:57
4KD是好小,关键你又说它含量很少,那能不能构建个带GFP之类的表达载体呢?这样至少大了

我的蛋白有His标签,可是这跟跑胶有什么关系呢?
5楼2015-08-12 20:47:51
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ghqiu09

禁虫 (正式写手)

本帖内容被屏蔽

6楼2015-08-12 20:54:19
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scmyjzq

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by ghqiu09 at 2015-08-12 20:54:19
我意思本是加个GST啊啥的融合蛋白,这样一下子就能大好多了,也容易做了
...

那就来不及了,这是转基因蛋白,坐等纯化的那种
7楼2015-08-12 21:10:09
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18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

【答案】应助回帖

http://www.detaibio.com/material-downloads.html
这里有不少资料有关于制胶的有关于镍柱纯化的,希望对你能有用吧
todayisdifficult,tomorrowismoredifficult,butthedayaftertomorrowisbeautiful
8楼2015-08-17 09:31:49
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