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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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阿维victor

银虫 (小有名气)

[交流] PAGE胶梳子和marker的问题。 已有6人参与

1.我做的胶为什么梳子那边很多都凝不起来?试剂问题还是配方问题?凝不起来的话点样都跑到其他点样口了。。。
2.还有如果要一口气点好多块胶,marker怎么样点比较好不容易混淆又不影响正常读胶?
3.点样的时候上一个口的样流了一点到下一个样,跑出来会不会有很大干扰?

我是新手,希望能得到各位的帮助!谢谢!

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ghqiu09

禁虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
本帖内容被屏蔽

6楼2015-08-09 19:11:58
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fly_锋

铁虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
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刚好看到您的问题,有点个人经验!一个梳子凝的问题,一方面你可以加大胶的浓度,另外有个小细节就是才洗过的梳子带水也是不容易凝的,您注意点。第二个其实很容易解决,我一般marker都是每排错开。第三个,是很讨厌的问题,而且也是直接影响你结果的,必须的解决,样千万不能混,要是你的孔充裕的话可以几个几个之间隔开空一个孔。希望可以帮到你!

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

9楼2015-08-10 11:15:39
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zhangyongzz

木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
Marker可以采取第几块胶点第几个孔,这样不容易hun x

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2楼2015-08-07 23:47:19
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chensi32

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可以加大 TEMED的量多加2到3微升这样可以让胶凝的快一点~还有也许是你凝胶时间不够最低30分钟

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3楼2015-08-08 06:59:16
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阿维victor

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by chensi32 at 2015-08-08 06:59:16
可以加大 TEMED的量多加2到3微升这样可以让胶凝的快一点~还有也许是你凝胶时间不够最低30分钟

好的,谢谢指导!

[ 发自小木虫客户端 ]
4楼2015-08-08 15:47:09
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阿维victor

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zhangyongzz at 2015-08-07 23:47:19
Marker可以采取第几块胶点第几个孔,这样不容易hun x

好的!谢谢!

[ 发自小木虫客户端 ]
5楼2015-08-08 15:47:36
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阿维victor

银虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by ghqiu09 at 2015-08-09 19:11:58
第一个问题反正我没碰见过,凝的时间不够长?第二个问题,个人习惯,只要你自己能记住就行了,第三个,看你IB的是什么蛋白了,如果你要IB的蛋白特别强,就不好了,串孔这种事真的很讨厌,解决办法就是摸准自己一个孔 ...

很好的建议!谢谢!我去试试看。

[ 发自小木虫客户端 ]
7楼2015-08-10 07:40:34
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dingyi3363

铜虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
1、是琼脂的问题吧
2、一般点中间
3、孔太欠或是样品太多,点出来也看运气
8楼2015-08-10 08:19:19
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lcuwxy

铜虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
胶不凝的原因有很多啊,先检查你的试剂有没有问题,比如PH6.8 8.8的Tris 是不是OK,AP 是不是OK,如果没有问题那就是时间问题,或者操作问题。maker 加的位置我都是放在最左边,记住跑胶的时候胶板的位置,按照从前往后的顺序 1 2 3 4 ,转膜的时候一个一个来,在膜的右下角写上相应的数字,这样转完膜就不用担心会混了。
至于最后一个问题,这要看你跑什么蛋白以及蛋白丰度了,只能说好好做,别让它漏出去。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

10楼2015-08-10 12:29:08
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