24小时热门版块排行榜    

查看: 654  |  回复: 3

guyue900905

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于引物的设计问题,请教高手指点一二,感激不尽~~ 已有1人参与

我想做屎肠球菌的pfs基因,进行pcr,但是我查找的ncbi中没有屎肠球菌的pfs基因的全序列,所以我找了粪肠球菌的pfs基因进行设计引物,但是电泳也跑不出来目的条带,现在不知道该怎么做了,请高手指点一下,真心感谢 ,实验出现问题真的很头疼,感谢感谢感谢大家!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gnot_nail

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-07-27 21:50:56
为什么找粪肠的?你引物设计了几对?没有屎肠全基因的话那部分基因片段应该有吧,拿部分的基因片段去blast看最相似的是哪个物种的,然后用那个物种的全序列设计下引物试试。
2楼2015-07-27 20:13:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

guyue900905

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by gnot_nail at 2015-07-27 20:13:19
为什么找粪肠的?你引物设计了几对?没有屎肠全基因的话那部分基因片段应该有吧,拿部分的基因片段去blast看最相似的是哪个物种的,然后用那个物种的全序列设计下引物试试。

因为我看的文献里和我做的差不多的只有粪场球菌,那部分片段应该怎么找那?
3楼2015-07-28 08:49:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gnot_nail

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by guyue900905 at 2015-07-28 08:49:44
因为我看的文献里和我做的差不多的只有粪场球菌,那部分片段应该怎么找那?...

。。我还以为你已经有屎肠的部分片段= =。。找的话,试试看在NCBI上搜索基因和物种的拉丁名,然后看有哪些信息。有的是序列 有的是文章,序列的话上面可能有注释可以判断 文章的话就看别人研究里有没有用的到相关的序列了。
4楼2015-07-28 19:52:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 guyue900905 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 澳大利亚 Murdoch University 全奖博士招生(3个名额)地质化工冶金领域 +11 AI8RaGaPaSCR 2026-08-07 11/550 2026-08-13 16:15 by UAjPKo3ZlAnV
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +3 majunge000 2026-08-11 5/250 2026-08-13 16:10 by majunge000
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +9 majunge000 2026-08-10 11/550 2026-08-13 10:40 by ZH远山
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +22 Lanmanbaby 2026-08-09 36/1800 2026-08-12 22:50 by sdfapple719
[基金申请] 好奇怪的filecode +5 布布和一二 2026-08-08 6/300 2026-08-12 16:11 by 云上清扬
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +3 yuleib84 2026-08-11 3/150 2026-08-11 21:53 by jnhyjjm
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +8 Tide man 2026-08-10 9/450 2026-08-11 20:39 by beefly
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 关于代码变化问题,想知道的进来 +17 且听虎啸 2026-08-07 24/1200 2026-08-10 18:35 by zhangduo2008
[基金申请] 静等基金结果 +5 gjjjzhong 2026-08-10 16/800 2026-08-10 17:19 by Tide man
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] fileCode有新解读? +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于filecode,很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
信息提示
请填处理意见