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star97lx

新虫 (小有名气)

[求助] western blot检测出来是原蛋白质的两倍左右大小 已有3人参与

请教一下各位大神,最近在用 western blot检测NF-KB的表达的时候,抗体是兔抗鼠p65,检测出来的条带一直是100多KD,想问一下这个是什么情况?NF-KB不是65KD大小么?感觉曝光后的条带大小是65的两倍左右了。感激不尽!
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star97lx

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2015-07-23 12:57:09
哥们,NF-KB不是就一个蛋白,整个家族有四五个不同的蛋白。
你确定买的抗体是p65?
NF-kB还有p105, p100呢

我确定是买的p65哈,只不过是国产的,p65应该只是其中一个亚基,而且不管买p105或者其他难道条带不是应该都在65KD左右么?
8楼2015-08-01 10:42:10
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youngfly521

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
那肯定是杂带了嘛,阳性对照里的目标条带做看吗?
骚年 奔跑吧
2楼2015-07-22 12:05:52
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foolduke

禁虫 (小有名气)

感谢参与,应助指数 +1
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3楼2015-07-22 12:54:14
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star97lx

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by foolduke at 2015-07-22 12:54:14
是不是形成了二聚体了?有可能跑胶的时候二聚体没有打开吧。

我开始也是考虑得形成二聚体了,如果是二聚体应该怎样打开呢?会不会对我的检测结果有影响?
4楼2015-07-23 08:24:02
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