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如果可以_319

铜虫 (小有名气)

[求助] 用药典方法测定人参含量梯度设置问题? 已有1人参与

最近用药典一部方法测定人参的含量,为什么我做不出来,不出峰,对照也是一样不出峰,难道是我梯度设置有问题,求指教。
药典方法如下:
色谱条件与系统适用性试验    以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈为流动相A,以水为流动相B,按下表中的规定进行梯度洗脱;检测波长为203nm。理论板数按人参皂苷.Rg。峰计算应不低于6000。
时间                        流动相A%                            流动相B%
0~35                          19                                           81
35~55                        19-29                                     81-71
55~70                        29                                           71
70~100                      29-40                                      71-60
药典梯度是如此表示的,实际操作中梯度该如何设置呢?另外我用的是菲罗门的C18柱(250*4.6mm)
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czzlnkar

新虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
如果可以_319: 金币+5, 有帮助 2015-07-23 16:11:08
就按照这个设定的啊,比如安捷伦的液相,打开“设置泵”,如果不使用梯度直接在上面的ABCD溶剂设置含量比即可,如果使用梯度就在上面写上0分钟的时候含量比,下面点插入,会出一行表格,然后追加,写上相应时间点的溶剂配比,如果相邻设定的2个时间点配比一样则这一区间无梯度,如果不一样则这一区间时间溶剂配比会渐变到下一时间点的区间,换句话说你就需要写0,35,55等等这些临界点即可。具体问实验室会用的,光说还是不好使。WATERS的没用过就不知道了
2楼2015-07-07 11:13:23
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如果可以_319

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by czzlnkar at 2015-07-07 11:13:23
就按照这个设定的啊,比如安捷伦的液相,打开“设置泵”,如果不使用梯度直接在上面的ABCD溶剂设置含量比即可,如果使用梯度就在上面写上0分钟的时候含量比,下面点插入,会出一行表格,然后追加,写上相应时间点的 ...

时间                        流动相A%                            流动相B%
0
35                          19                                           81
55                        29                                            71
70                        29                                            71
100                      40                                             60
这样设置可以吗
3楼2015-07-07 16:14:05
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czzlnkar

新虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 如果可以_319 at 2015-07-07 16:14:05
时间                        流动相A%                            流动相B%
0
35                          19                                           81
55                        29                 ...

差不多了,0分钟也写上那个19,81就可以了,多样品的话加后运行,重新平衡柱子再进样
4楼2015-07-07 16:49:23
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