| 查看: 1279 | 回复: 4 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[求助]
急，western信号弱 已有3人参与
|
|||
做了目的蛋白-GFP的植株，能够观察到荧光，但是western用GFP抗体（Roche）一直检测不到信号。先想到抗体不好，纯化了GFP的重组蛋白，5倍连续稀释上样，然后用GFP抗体检测，能够看到30ng上样量以上有信号，之后然后把PVDF膜CBB染色，在30ng量也能看到很微弱的条带。这样的western是不是信号太弱了，感觉跟CBB染色没多大区别。后来也检测6His抗体，目的蛋白的多肽抗体都是这个灵敏度。这个western有什么问题啊？为什么信号这么弱，已经试过不同的一抗，二抗浓度组合，还有什么方法提高灵敏度？ 屏幕快照 2015-07-04 12.40.51.png |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 多肽合成技术交流 |
» 猜你喜欢
筑牢营养安全线：以精准检测，护健康基石
已经有0人回复
-
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有107人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 急急急！！western 半干转膜屡次失败，求大神救命！
已经有11人回复
- 急！500kD 蛋白western 求助
已经有17人回复
- Western目的条带处完全无信号（连背景都没），什么情况？
已经有4人回复
- WB结果杂不出目的条带，只有特别亮的非特异性条带，求高手解释原因
已经有10人回复
- Western Blot中蛋白条带信号强弱与上样体积不成正比的可能原因？
已经有3人回复
- 求助EGFP蛋白的western及免疫荧光问题！！！！！急急急！！！！！
已经有4人回复
- 原核表达重组质粒提取
已经有7人回复
- 【求助】紧急求助：western分离胶浓度怎么确定？
已经有10人回复
4楼2015-09-19 20:45:26
|
本帖内容被屏蔽 |
3楼2015-09-19 20:07:14
5楼2015-10-31 17:08:41