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急，western信号弱 已有3人参与
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做了目的蛋白-GFP的植株，能够观察到荧光，但是western用GFP抗体（Roche）一直检测不到信号。先想到抗体不好，纯化了GFP的重组蛋白，5倍连续稀释上样，然后用GFP抗体检测，能够看到30ng上样量以上有信号，之后然后把PVDF膜CBB染色，在30ng量也能看到很微弱的条带。这样的western是不是信号太弱了，感觉跟CBB染色没多大区别。后来也检测6His抗体，目的蛋白的多肽抗体都是这个灵敏度。这个western有什么问题啊？为什么信号这么弱，已经试过不同的一抗，二抗浓度组合，还有什么方法提高灵敏度？ 屏幕快照 2015-07-04 12.40.51.png |
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 多肽合成技术交流 |
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