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yz2007433052木虫 (职业作家)
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如何用琼脂糖凝胶电泳区分相同长度的ssDNA和dsDNA 已有3人参与
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今天做了一下相同长度dsDNA和ssDNA的分离。如图所示，line1是纯dsDNA，line2是dsDNA+ssDNA（链长均为841 mer或者841 bps），分离条件是：2%的琼脂糖凝胶电泳，200V，30 min。今天没有分出来，我想问一下怎么样才能将800多长度的ssDNA和dsDNA分离开。 图片1.jpg |
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yz2007433052
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2楼2015-06-24 21:20:22
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yz2007433052: 金币+33, ★★★很有帮助 2015-06-26 11:26:50
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LZ你确定你得到841nt的ssDNA了？你这做的是不对称PCR吧？一般ssDNA的带会出现在dsDNA下方，并伴随杂带和弥散。你这图既无杂带又无明显弥散，很难说你得到ssDNA了。line2明显亮了不少，条带相对单一，先不考虑你点样量的差异，我感觉line2仍是dsDNA.你可以跑个DNA native page验证下，以在你dsDNA上方是否出带为准，我感觉你现在的任务不是分离，而是分析一下你制备ssDNA的方法是否可靠！ [ 发自小木虫客户端 ] |
3楼2015-06-25 02:55:25
yz2007433052
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baichi121234
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7楼2015-06-28 11:04:22
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