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kali509

新虫 (初入文坛)

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[求助] 大肠杆菌电镜扫描实验请教已有1人参与

请问大肠杆菌做SEM 扫描时重悬溶液是用的什么？
E.coli 在 37℃，24h培养后，用PBS清洗重悬，然后自然干燥，上机后SEM 发现基本都是盐溶液的结晶，看不到大肠杆菌。需要换成去离子水吗？
请问做过细菌电镜扫描的同学，操作步骤的注意事项。谢谢

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1楼 2015-06-08 16:06:26

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kali509

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引用回帖:

3楼: Originally posted by snoopytbw at 2015-06-09 10:04:51
PBS洗完，用酒精或者乙酸乙酯从低浓度到高浓度脱水。然后用戊二醛或者多聚甲醛固定。冷冻干燥的话，我觉得没必要，脱水固定玩，自然晾干效果还好一点呢。
你SEM做出来全是白色结晶，是因为PBS是盐溶液啊。。。

十分感谢我看好多文献都是先用戊二醛后用酒精梯度脱水。先后顺序有区别吗？
固定的作用主要是为了保持细胞的原始状态吗？