应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 大肠杆菌 电镜扫描实验请教
81/1返回列表
查看: 2060  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

kali509

新虫 (初入文坛)

[求助] 大肠杆菌 电镜扫描实验请教 已有1人参与

请问大肠杆菌做SEM 扫描时 重悬溶液是用的什么？
E.coli 在 37℃，24h培养后，用PBS清洗 重悬，然后自然干燥，上机后SEM 发现基本都是盐溶液的结晶，看不到大肠杆菌。需要换成去离子水吗？
请问做过细菌电镜扫描的同学，操作步骤的注意事项。谢谢
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2015-06-08 16:06:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

guoqin_shiyin

银虫 (正式写手)
步骤极其繁琐。。。你的处理过于简单。要切片。。'或者冷冻冻干后看

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
2楼2015-06-08 19:43:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

snoopytbw

荣誉版主 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
PBS洗完，用酒精或者乙酸乙酯从低浓度到高浓度脱水。然后用戊二醛或者多聚甲醛固定。冷冻干燥的话，我觉得没必要，脱水固定玩，自然晾干效果还好一点呢。
你SEM做出来全是白色结晶，是因为PBS是盐溶液啊。。。
赞一下(3人) 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

kali509
3楼2015-06-09 10:04:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kali509

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by snoopytbw at 2015-06-09 10:04:51
PBS洗完，用酒精或者乙酸乙酯从低浓度到高浓度脱水。然后用戊二醛或者多聚甲醛固定。冷冻干燥的话，我觉得没必要，脱水固定玩，自然晾干效果还好一点呢。
你SEM做出来全是白色结晶，是因为PBS是盐溶液啊。。。

十分感谢 我看好多文献都是先用戊二醛后用酒精梯度脱水。 先后顺序有区别吗？
固定的作用主要是为了保持细胞的原始状态吗？
赞一下 回复此楼
4楼2015-06-09 13:32:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kali509

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by snoopytbw at 2015-06-09 10:04:51
PBS洗完，用酒精或者乙酸乙酯从低浓度到高浓度脱水。然后用戊二醛或者多聚甲醛固定。冷冻干燥的话，我觉得没必要，脱水固定玩，自然晾干效果还好一点呢。
你SEM做出来全是白色结晶，是因为PBS是盐溶液啊。。。

2.5% 戊二醛是水溶液还是PBS溶液呢， 如果是PBS盐溶液的话，就应该是先戊二醛固定，然后酒精或者乙酸乙酯脱水？

自然干燥整夜是不是可以了？ 不好意思问题有点多 ；）
赞一下 回复此楼
5楼2015-06-09 14:01:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

snoopytbw

荣誉版主 (著名写手)
不好意思，说反了。先固定后脱水。。嘿嘿，sorry
赞一下 回复此楼
6楼2015-06-11 09:51:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kali509

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by snoopytbw at 2015-06-11 09:51:47
不好意思，说反了。先固定后脱水。。嘿嘿，sorry

恩恩  谢谢~~戊二醛是水溶液吗， 买来的戊二醛浓度是25%，是用水稀释就好了吗？
赞一下 回复此楼
7楼2015-06-11 20:32:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

耀日光

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by snoopytbw at 2015-06-09 10:04:51
PBS洗完，用酒精或者乙酸乙酯从低浓度到高浓度脱水。然后用戊二醛或者多聚甲醛固定。冷冻干燥的话，我觉得没必要，脱水固定玩，自然晾干效果还好一点呢。
你SEM做出来全是白色结晶，是因为PBS是盐溶液啊。。。

同学，请问你做出来的电镜，细菌表面形态怎么样啊，我之前做了电镜也是自然风干的，但是表面出现了很多裂纹，对照组的菌体还破碎了，我想问是不是由于我洗的太多次或者没有冷冻干燥
赞一下 回复此楼
8楼2019-08-12 10:08:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 kali509 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 让我中一个面上吧！ +8 大萍1987 2026-08-20 10/500 2026-08-20 21:48 by 大萍1987
[基金申请] 时间戳又变了 +12 wuchongjun 2026-08-20 17/850 2026-08-20 20:05 by spzhao
[基金申请] 今天系统多次维护，明天很可能放榜！ +10 zju2000 2026-08-16 11/550 2026-08-20 20:02 by cl479861084
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +21 yaoyewhu2008 2026-08-20 22/1100 2026-08-20 17:03 by yaoyewhu2008
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+3 snowwithsea 2026-08-19 12/600 2026-08-20 15:56 by lfy8008
[基金申请] 重要消息，中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 今天基金会出结果吗？20260819 +14 kkkl_v 2026-08-19 15/750 2026-08-20 08:21 by sunzitan
[基金申请] filecode，4个jtjc了 +11 ziyangfang 2026-08-19 13/650 2026-08-19 21:28 by aasahr
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低？主要原因有哪些？ +5 瞬息宇宙 2026-08-15 5/250 2026-08-19 20:23 by super2002521
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +4 yuleib84 2026-08-19 5/250 2026-08-19 19:52 by hhs666
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +10 wangze12014 2026-08-14 12/600 2026-08-19 16:56 by 苦难博士
[基金申请] 2027广东省杰青 +4 奶牛小黑 2026-08-15 10/500 2026-08-19 11:02 by wanfengnew
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 快农历七夕节了，轻松一下，男人悄悄话，女施主请不要进来。 +6 Tide man 2026-08-14 7/350 2026-08-19 09:56 by ZJTJZ
[基金申请] 什么时候开奖？ +6 CrisMessi 2026-08-18 6/300 2026-08-19 08:06 by Equinoxhua
[基金申请] 明天放榜？ +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[论文投稿] 投稿咨询 +4 wwm09 2026-08-17 6/300 2026-08-18 15:36 by wwm09
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +14 archvillain 2026-08-15 26/1300 2026-08-18 13:37 by phantomgost
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭