| 查看: 2729 | 回复: 7 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
tianlanchong新虫 (初入文坛)
|
[求助]
凋亡DNA Ladder 检测 已有1人参与
|
|
新虫一只，第一次在小木虫提问 我这周开始做DNA ladder实验，今天刚得到这样一张图，看不太懂，请各位有经验的同学帮忙分析一下结果，谢谢！我想知道我的DNA是不是降解了，能否从这张图看出凋亡的情况？我的操作步骤是这样的： (1) 取100~300mg冻存的动物组织，用小剪刀尽量剪碎，转入匀浆器，加入1ml裂解液，电动匀浆。室温放置5分钟。 (2) 裂解细胞：加1ml细胞裂解液，裂解液在使用前加入RNase（20mg/ml）使其终浓度为20μg/mg，之后37℃孵育37分钟；充分混匀再加蛋白酶K（20mg/ml）100μl，置65℃水浴消化2小时或过夜； (3) 蛋白处理：加750μl 8mol/L的醋酸钾，4℃15min，再加750μl氯仿，充分混匀后，10000r/min离心10分钟后，将上清移至一新的Eppendorf管中； (4) 沉淀DNA：加入750μl无水乙醇，上下轻柔颠倒混合，即可见乳白色沉淀，若不明显时可置-20℃过夜，12000r/min离心10分钟，去上清； (5) 洗涤DNA：加1ml70%乙醇，混匀，10000r/min 离心5min，去上清； (6) 溶解DNA：根据 DNA 沉淀的大小，加一定量的蒸馏水或TE，37℃溶解； (7) 测定DNA浓度； (8) 2%琼脂糖凝胶电泳80V 2小时； 衷心感谢给我回复的大虾们！ 裂解液的配方： 10mM TRIS-HCL, 0.1M EDTA， 0.8%（m/v）SDS  2015-06-03 dna ladder 1.jpg |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有65人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
-
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 碧云天试剂盒检测caspase 3的活性
已经有7人回复
- 细胞通路相关-凋亡坏死
已经有11人回复
- DNA ladder 观察细胞凋亡
已经有17人回复
- 凋亡 细胞凋亡
已经有4人回复
- DNA ladder检测试剂盒 求助
已经有5人回复
- 组织凋亡检测方法
已经有8人回复
- DNA LADDER 检测细胞凋亡
已经有5人回复
- 用Hoechst33342/PI 双染做流式，居然只检测到坏死细胞，这是个什么状况
已经有12人回复
- 【求助/交流】AnnexinV/PI双染检测凋亡细胞，结果“诡异”，求帮助！
已经有36人回复
- 【求助/交流】细胞死亡率检测
已经有8人回复
tianlanchong
新虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 87
- 散金: 15
- 红花: 1
- 帖子: 10
- 在线: 13.3小时
- 虫号: 2367549
- 注册: 2013-03-22
- 专业: 水产生物免疫学与病害控制
4楼2015-06-04 22:13:45
calorimetry
铜虫 (正式写手)
- 应助: 51 (初中生)
- 金币: 126.8
- 红花: 13
- 帖子: 569
- 在线: 36.5小时
- 虫号: 3901654
- 注册: 2015-06-01
- 性别: MM
- 专业: 生物大分子结构与功能
2楼2015-06-04 11:18:09
tianlanchong
新虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 87
- 散金: 15
- 红花: 1
- 帖子: 10
- 在线: 13.3小时
- 虫号: 2367549
- 注册: 2013-03-22
- 专业: 水产生物免疫学与病害控制
3楼2015-06-04 22:07:36
tianlanchong
新虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 87
- 散金: 15
- 红花: 1
- 帖子: 10
- 在线: 13.3小时
- 虫号: 2367549
- 注册: 2013-03-22
- 专业: 水产生物免疫学与病害控制
5楼2015-06-04 22:38:01
