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丫头“笑笑”

银虫 (小有名气)

[求助] 碧云天试剂盒检测caspase 3的活性已有2人参与

按照说明书提取蛋白,蛋白浓度也都比较高,约3mg/ml。可为何基本不显色,放了24h,都看不见明显的颜色。酶标仪检测,吸光度也就比空白高一点点。加药组和对照组都这样。求解!!我是有什么地方没注意还是怎么了?
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我要我的自由!
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丫头“笑笑”

银虫 (小有名气)

这个不是很常见的实验么?怎么都没有人回复呢?
我要我的自由!
2楼2014-11-18 09:08:37
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j1234555jhh

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 丫头“笑笑” at 2014-11-18 09:08:37
这个不是很常见的实验么?怎么都没有人回复呢?

你好,正好这些天我在做这个实验,我用的是碧云天的盒子。每次测蛋白浓度都在1-3mg/mL之间,但我也是颜色没有变化,用一次性手套包住过夜后再测OD值,OD值几乎一样,结果反而更差,不知道为什么。我的加样体积是按3mg/mL算的。
3楼2014-11-18 11:15:46
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丫头“笑笑”

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by j1234555jhh at 2014-11-18 11:15:46
你好,正好这些天我在做这个实验,我用的是碧云天的盒子。每次测蛋白浓度都在1-3mg/mL之间,但我也是颜色没有变化,用一次性手套包住过夜后再测OD值,OD值几乎一样,结果反而更差,不知道为什么。我的加样体积是按 ...

我在想是不是碧云天的试剂盒有问题啊,这么简单地操作,硬是不显色,哎。。。
我要我的自由!
4楼2014-11-19 21:57:03
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毛小能

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 丫头“笑笑” at 2014-11-19 21:57:03
我在想是不是碧云天的试剂盒有问题啊,这么简单地操作,硬是不显色,哎。。。...

你好,最近也要做caspase-3活性检测,不知道你的问题解决了?是用什么方法检测的?
5楼2015-05-25 15:34:28
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linxiaolin08

捐助贵宾 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 丫头“笑笑” at 2014-11-19 21:57:03
我在想是不是碧云天的试剂盒有问题啊,这么简单地操作,硬是不显色,哎。。。...

嗯,我前两天也是刚做完这个试剂盒。孵育了几个小时看颜色没有什么变化,就按照说明书上说的孵育了一晚上。第二天早上来了再看也是没有颜色变化。用酶标仪测过高剂量组的OD值也就比空白(不含样品)多了不到0.02。不知道是试剂盒的问题还是细胞的问题还是操作的问题
6楼2015-11-10 21:47:58
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clqxqx

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我也用过这个盒子,确实不显色,不知道版主现在解决这个问题没有?用哪个公司的试剂或者盒子靠谱?
7楼2015-12-05 17:12:17
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一捧阳光

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

各位大神,你们的问题都解决了吗?我也是用碧云天的caspase-3试剂,孵育了几个小时样品组OD值和空白只差0.01,不知道是操作有问题还是细胞有问题??
8楼2016-08-25 14:06:55
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