应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 活化形式的蛋白凋亡MARKER 如 caspase-3 parp 如何办
121/2返回列表12下一页
查看: 3236  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

2008liulin

铁虫 (著名写手)

[求助] 活化形式的蛋白凋亡MARKER 如 caspase-3 parp 如何办

如题，其实这个问题已经看过很多解释了，但是现在又面临这个问题，实在不知如何解决为好。
我买的是CST的抗体，PARP CASPASE-3 这两个抗体都是技能显示出总蛋白也能显示出活化形式的蛋白，所以我在PAPER 中显示时所有的FIGURES 中都包含了两个带，活化形式和未活化形式。问题是：

review 说我的凋亡显影不明显（几乎所有），事实上我觉得是明显的，另外一个review 也没有提到这个问题。所以我怀疑这个审稿人是不是只看未活化形式，没有看到剪切形式。（有些条带未活化形式是没有什么改变的，但是活化形式很明显）。现在我想把FIGURE 中所有的未活化形式都去除，只保留活化形式，不知道可以不可以？有师兄说，这样子会让审稿人觉得不好，不赞成这种做法。所以，纠结了，也不想好心改过去结果 被人家误解，直接被拒，现在是大修。主要问题也是处在这个审稿人身上，另外一个问题很少。 所以，怎么办？急求大神！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-01-30 21:25:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

2008liulin

铁虫 (著名写手)
2楼2013-01-31 09:45:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

2008liulin

铁虫 (著名写手)
3楼2013-02-03 12:53:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ccharlien

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-02-05 22:11:58
是不是你的图上标记的不清楚审稿人没注意到？
1.你现在样品还有，需要重复的实验量不多，可以买个Cleaved Caspase 3抗体重复你的实验，再用个别的方法检测凋亡
2.没法重复试验，选一张和原来文章里面不同的图，只显示活化蛋白，把标记做好，在信里解释清楚，被拒了就果断换杂志
赞一下 回复此楼
4楼2013-02-03 21:06:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

2008liulin

铁虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by ccharlien at 2013-02-03 21:06:05
是不是你的图上标记的不清楚审稿人没注意到？
1.你现在样品还有，需要重复的实验量不多，可以买个Cleaved Caspase 3抗体重复你的实验，再用个别的方法检测凋亡
2.没法重复试验，选一张和原来文章里面不同的图，只 ...

我太感谢你了！我的意思也是 我就把原来形式的给切了， 然后只放活化形式，并且在条带下面LABLE，让他能看清楚一下。怕就怕他把我拒了，我六月毕业，来不及了，怕有万一就麻烦了。~~~愁死了~~~ 我再补图，怕那个人还说不清楚，那我就比较郁闷了~~~愁死了
赞一下 回复此楼
5楼2013-02-03 23:01:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ccharlien

木虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 2008liulin at 2013-02-03 23:01:49
我太感谢你了！我的意思也是 我就把原来形式的给切了， 然后只放活化形式，并且在条带下面LABLE，让他能看清楚一下。怕就怕他把我拒了，我六月毕业，来不及了，怕有万一就麻烦了。~~~愁死了~~~ 我再补图，怕那个人 ...

不客气哈，一般用两个不同方法检测凋亡就没什么问题了
最好有和之前稿子里差不多质量的不一样的图，省得人看到后觉得你没改找茬，不过要是没有也就算了
把reviewer提到的其他问题都搞定了尽快重新提交，祝好运！
赞一下 回复此楼
6楼2013-02-04 01:23:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

乖乖宝贝

金虫 (小有名气)
楼主你好！我也在做这两个蛋白，用的抗体和你一样，可是我的切割形式总是不出现，或者是说和我药物浓度不成规律。我想问下你，药物作用细胞的时间点和出现切割条带之间有关系吗？而且对于Caspase-3 (35KD和17KD)和PRAP(116和85)，是在一样的实验条件下，同一张膜上做出来的吗？还是把总蛋白和切割形式的在胶上切开，分别转膜哦？我做这两个蛋白老是做不好，觉得很郁闷，你能不能告诉我一些你的经验哦？
赞一下 回复此楼
尽自己最大的努力，优秀毕业！
7楼2013-02-19 14:22:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

2008liulin

铁虫 (著名写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 乖乖宝贝 at 2013-02-19 14:22:51
楼主你好！我也在做这两个蛋白，用的抗体和你一样，可是我的切割形式总是不出现，或者是说和我药物浓度不成规律。我想问下你，药物作用细胞的时间点和出现切割条带之间有关系吗？而且对于Caspase-3 (35KD和17KD)和P ...

你好！1、没有活化形式的带你就找个阳性对照，一定有凋亡的，看看来验证你的样品问题还是抗体问题 2、是在一张膜上做出来的，转完膜箭膜就是了。
赞一下 回复此楼
8楼2013-02-20 15:38:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

choukeitou

木虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 乖乖宝贝 at 2013-02-19 15:22:51
楼主你好！我也在做这两个蛋白，用的抗体和你一样，可是我的切割形式总是不出现，或者是说和我药物浓度不成规律。我想问下你，药物作用细胞的时间点和出现切割条带之间有关系吗？而且对于Caspase-3 (35KD和17KD)和P ...

对于同时检测Caspase-3 (35KD和17KD)和PRAP(116和85)的问题， 转膜后，先做
Caspase-3 (35KD和17KD)的抗体反应，完了用glycine 洗一下，再做PRAP(116和85)的抗体反映。
赞一下 回复此楼
9楼2013-02-20 22:03:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

2008liulin

铁虫 (著名写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by choukeitou at 2013-02-20 22:03:02
对于同时检测Caspase-3 (35KD和17KD)和PRAP(116和85)的问题， 转膜后，先做
Caspase-3 (35KD和17KD)的抗体反应，完了用glycine 洗一下，再做PRAP(116和85)的抗体反映。...

剪开不就行了吗?
赞一下 回复此楼
10楼2013-02-21 15:19:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 2008liulin 的主题更新
121/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求老师收留调剂 +4 jiang姜66 2026-03-14 5/250 2026-03-15 20:11 by Winj1e
[考研] 321求调剂 +3 大米饭！ 2026-03-15 3/150 2026-03-15 17:48 by 哈哈哈哈嘿嘿嘿
[考研] 22408总分284求调剂 +3 InAspic 2026-03-13 3/150 2026-03-15 11:10 by zhq0425
[考研] 268求调剂 +5 一定有学上- 2026-03-14 6/300 2026-03-14 22:20 by 运气yunqi
[考研] 255求调剂 +3 李嘉慧， 2026-03-12 4/200 2026-03-14 16:58 by 有只狸奴
[考研] 一志愿天津大学，英一数二305分求调剂，四六级已过 +8 小小番的茄 2026-03-09 8/400 2026-03-14 01:53 by JourneyLucky
[考研] 云南财经大学信息学院计算机学硕专硕学位点 +3 zjptai 2026-03-10 5/250 2026-03-14 01:23 by 飞行琦
[考研] 311求调剂 +5 牛乳糖的卡卡 2026-03-10 5/250 2026-03-14 00:05 by JourneyLucky
[考研] 26调剂/材料/英一数二/总分289/已过A区线 +6 步川酷紫123 2026-03-13 6/300 2026-03-13 21:59 by 星空星月
[考研] 26调剂/材料科学与工程/总分295/求收留 +9 2026调剂侠 2026-03-12 9/450 2026-03-13 20:46 by 18595523086
[考研] 材料工程调剂 +4 咪咪空空 2026-03-11 4/200 2026-03-13 19:57 by JourneyLucky
[考研] 材料301分求调剂 +5 Liyouyumairs 2026-03-12 5/250 2026-03-13 14:42 by JourneyLucky
[考研] 308求调剂 +3 是Lupa啊 2026-03-12 3/150 2026-03-13 14:30 by 求调剂zz
[考研] 268求调剂 +4 好运连绵不绝 2026-03-12 4/200 2026-03-13 10:45 by hyswxzs
[考研] 一志愿华中师范071000，325求调剂 +5 RuitingC 2026-03-12 5/250 2026-03-13 10:43 by hyswxzs
[考研] 08食品或轻工求调剂，本科发表3篇sci一区top论文，一志愿南师大食品科学与工程 +3 我是一个兵， 2026-03-10 3/150 2026-03-13 10:21 by Yuyi.
[考研] 化工学硕306求调剂 +9 42838695 2026-03-12 9/450 2026-03-13 10:16 by houyaoxu
[考研] 纺织、生物、化学、材料相关专业招生了 +4 耶耶业 2026-03-09 7/350 2026-03-12 19:05 by Equinoxhua
[考研] 290求调剂 +3 柯淮然 2026-03-10 8/400 2026-03-11 13:48 by 柯淮然
[硕博家园] 木虫好像不热闹了，是不是？ +4 偏振片 2026-03-10 4/200 2026-03-10 09:51 by longwave
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭