24小时热门版块排行榜    

查看: 3657  |  回复: 11

乖乖宝贝

金虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 2008liulin at 2013-02-20 15:38:40
你好!1、没有活化形式的带你就找个阳性对照,一定有凋亡的,看看来验证你的样品问题还是抗体问题 2、是在一张膜上做出来的,转完膜箭膜就是了。...

哦,我想可能是我蛋白浓度比较低,3mg每微升,切割型的表达相对较低,所以出不来。我用恒流250mA,湿转30min,0.22mm的膜,丽春红染色35KD的都很清楚了。我还想问问楼主,就是启动caspase-3,是不是收集细胞的时间也重要.
我做PARP ,85KD的出来了,但是目标条带和上下的杂带连在一起。我用CST的一抗,总是只有杂带。有没有什么方法可以让不同分子量的蛋白之间分得更加开一点。我用10%的胶,60V浓缩80V分离?太感谢楼主了……
尽自己最大的努力,优秀毕业!
11楼2013-02-21 17:27:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

2008liulin

铁虫 (著名写手)

引用回帖:
11楼: Originally posted by 乖乖宝贝 at 2013-02-21 17:27:29
哦,我想可能是我蛋白浓度比较低,3mg每微升,切割型的表达相对较低,所以出不来。我用恒流250mA,湿转30min,0.22mm的膜,丽春红染色35KD的都很清楚了。我还想问问楼主,就是启动caspase-3,是不是收集细胞的时间也 ...

10%胶 120v 跑到loading 马上要跑下去就停下 大概90-100min 因为跑出去的话 caspase-3 的15KD 就看不到了。这样应该可以分开的。CST抗体还好吧 杂带应该还好
12楼2013-02-22 12:01:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 2008liulin 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的? +14 爱看书的可乐 2026-08-26 16/800 2026-08-26 18:22 by skyjudy
[基金申请] 我不理解! +9 Edward_pc 2026-08-26 14/700 2026-08-26 18:03 by hsding2026
[基金申请] 系统查不到 +10 董八千 2026-08-26 10/500 2026-08-26 16:30 by Equinoxhua
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +9 炎黄贵胄 2026-08-22 10/500 2026-08-26 15:40 by semaglutide
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +6 process2012 2026-08-23 9/450 2026-08-26 15:33 by process2012
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件,有关系吗? +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +23 koalala 2026-08-24 26/1300 2026-08-26 14:29 by 宝贝虫子
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +4 叶九微 2026-08-26 4/200 2026-08-26 10:52 by xiacongxu
[基金申请] 牛来!米来!面来! +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
[基金申请] 明天应该可查了!? +6 chengyan1220 2026-08-23 6/300 2026-08-25 19:45 by zfd97
[基金申请] 某些机构,以效率低为荣,以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
[教师之家] 导师吐槽:我怎么摊上了这么个极品研究生! +3 苏东坡二世 2026-08-23 3/150 2026-08-25 10:35 by shisan1313
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +13 kulium 2026-08-21 16/800 2026-08-24 16:27 by superceng
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办? +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 时间戳今天,20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
信息提示
请填处理意见