应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 活化形式的蛋白凋亡MARKER 如 caspase-3 parp 如何办
121/2返回列表12下一页
查看: 3661  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

2008liulin

铁虫 (著名写手)

[求助] 活化形式的蛋白凋亡MARKER 如 caspase-3 parp 如何办

如题，其实这个问题已经看过很多解释了，但是现在又面临这个问题，实在不知如何解决为好。
我买的是CST的抗体，PARP CASPASE-3 这两个抗体都是技能显示出总蛋白也能显示出活化形式的蛋白，所以我在PAPER 中显示时所有的FIGURES 中都包含了两个带，活化形式和未活化形式。问题是：

review 说我的凋亡显影不明显（几乎所有），事实上我觉得是明显的，另外一个review 也没有提到这个问题。所以我怀疑这个审稿人是不是只看未活化形式，没有看到剪切形式。（有些条带未活化形式是没有什么改变的，但是活化形式很明显）。现在我想把FIGURE 中所有的未活化形式都去除，只保留活化形式，不知道可以不可以？有师兄说，这样子会让审稿人觉得不好，不赞成这种做法。所以，纠结了，也不想好心改过去结果 被人家误解，直接被拒，现在是大修。主要问题也是处在这个审稿人身上，另外一个问题很少。 所以，怎么办？急求大神！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-01-30 21:25:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

2008liulin

铁虫 (著名写手)
2楼2013-01-31 09:45:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

2008liulin

铁虫 (著名写手)
3楼2013-02-03 12:53:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ccharlien

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-02-05 22:11:58
是不是你的图上标记的不清楚审稿人没注意到？
1.你现在样品还有，需要重复的实验量不多，可以买个Cleaved Caspase 3抗体重复你的实验，再用个别的方法检测凋亡
2.没法重复试验，选一张和原来文章里面不同的图，只显示活化蛋白，把标记做好，在信里解释清楚，被拒了就果断换杂志
赞一下 回复此楼
4楼2013-02-03 21:06:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

2008liulin

铁虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by ccharlien at 2013-02-03 21:06:05
是不是你的图上标记的不清楚审稿人没注意到？
1.你现在样品还有，需要重复的实验量不多，可以买个Cleaved Caspase 3抗体重复你的实验，再用个别的方法检测凋亡
2.没法重复试验，选一张和原来文章里面不同的图，只 ...

我太感谢你了！我的意思也是 我就把原来形式的给切了， 然后只放活化形式，并且在条带下面LABLE，让他能看清楚一下。怕就怕他把我拒了，我六月毕业，来不及了，怕有万一就麻烦了。~~~愁死了~~~ 我再补图，怕那个人还说不清楚，那我就比较郁闷了~~~愁死了
赞一下 回复此楼
5楼2013-02-03 23:01:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ccharlien

木虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 2008liulin at 2013-02-03 23:01:49
我太感谢你了！我的意思也是 我就把原来形式的给切了， 然后只放活化形式，并且在条带下面LABLE，让他能看清楚一下。怕就怕他把我拒了，我六月毕业，来不及了，怕有万一就麻烦了。~~~愁死了~~~ 我再补图，怕那个人 ...

不客气哈，一般用两个不同方法检测凋亡就没什么问题了
最好有和之前稿子里差不多质量的不一样的图，省得人看到后觉得你没改找茬，不过要是没有也就算了
把reviewer提到的其他问题都搞定了尽快重新提交，祝好运！
赞一下 回复此楼
6楼2013-02-04 01:23:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

乖乖宝贝

金虫 (小有名气)
楼主你好！我也在做这两个蛋白，用的抗体和你一样，可是我的切割形式总是不出现，或者是说和我药物浓度不成规律。我想问下你，药物作用细胞的时间点和出现切割条带之间有关系吗？而且对于Caspase-3 (35KD和17KD)和PRAP(116和85)，是在一样的实验条件下，同一张膜上做出来的吗？还是把总蛋白和切割形式的在胶上切开，分别转膜哦？我做这两个蛋白老是做不好，觉得很郁闷，你能不能告诉我一些你的经验哦？
赞一下 回复此楼
尽自己最大的努力，优秀毕业！
7楼2013-02-19 14:22:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

2008liulin

铁虫 (著名写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 乖乖宝贝 at 2013-02-19 14:22:51
楼主你好！我也在做这两个蛋白，用的抗体和你一样，可是我的切割形式总是不出现，或者是说和我药物浓度不成规律。我想问下你，药物作用细胞的时间点和出现切割条带之间有关系吗？而且对于Caspase-3 (35KD和17KD)和P ...

你好！1、没有活化形式的带你就找个阳性对照，一定有凋亡的，看看来验证你的样品问题还是抗体问题 2、是在一张膜上做出来的，转完膜箭膜就是了。
赞一下 回复此楼
8楼2013-02-20 15:38:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

choukeitou

木虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 乖乖宝贝 at 2013-02-19 15:22:51
楼主你好！我也在做这两个蛋白，用的抗体和你一样，可是我的切割形式总是不出现，或者是说和我药物浓度不成规律。我想问下你，药物作用细胞的时间点和出现切割条带之间有关系吗？而且对于Caspase-3 (35KD和17KD)和P ...

对于同时检测Caspase-3 (35KD和17KD)和PRAP(116和85)的问题， 转膜后，先做
Caspase-3 (35KD和17KD)的抗体反应，完了用glycine 洗一下，再做PRAP(116和85)的抗体反映。
赞一下 回复此楼
9楼2013-02-20 22:03:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

2008liulin

铁虫 (著名写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by choukeitou at 2013-02-20 22:03:02
对于同时检测Caspase-3 (35KD和17KD)和PRAP(116和85)的问题， 转膜后，先做
Caspase-3 (35KD和17KD)的抗体反应，完了用glycine 洗一下，再做PRAP(116和85)的抗体反映。...

剪开不就行了吗?
赞一下 回复此楼
10楼2013-02-21 15:19:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 2008liulin 的主题更新
121/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的？ +15 爱看书的可乐 2026-08-26 17/850 2026-08-27 02:26 by xxniao123
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 LIbGuocjEEYw 2026-08-26 4/200 2026-08-27 02:01 by Ie9AyIAvGbvs
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 +4 晴天加油 2026-08-26 5/250 2026-08-26 21:27 by 木风9012
[基金申请] 我不理解！ +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +7 process2012 2026-08-23 10/500 2026-08-26 19:23 by hmhminy
[基金申请] 系统查不到 +10 董八千 2026-08-26 10/500 2026-08-26 16:30 by Equinoxhua
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +23 koalala 2026-08-24 26/1300 2026-08-26 14:29 by 宝贝虫子
[基金申请] 哪位高人中了，把查询到的截图贴出来让我看看，让我长长见识 +4 yuleib84 2026-08-26 5/250 2026-08-26 13:40 by yuleib84
[基金申请] 科研孤儿太难了 +21 我4大白菜 2026-08-20 22/1100 2026-08-26 11:29 by nlgza
[基金申请] 国际合作可查了，中了面上 +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 国合现在查不到了吗？ +10 chengyan1220 2026-08-24 20/1000 2026-08-26 08:57 by peasantsprig
[基金申请] 明天应该可查了！？ +6 chengyan1220 2026-08-23 6/300 2026-08-25 19:45 by zfd97
[基金申请] 人气不行了 +11 fansofjerry 2026-08-21 11/550 2026-08-25 11:04 by 孤独的英雄6
[基金申请] 我面上完蛋了 +13 且听虎啸 2026-08-20 14/700 2026-08-25 09:10 by mrkang
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +13 kulium 2026-08-21 16/800 2026-08-24 16:27 by superceng
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办？ +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 时间戳今天，20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 看来今天不会放榜了？ +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭