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huangkefcc

新虫 (初入文坛)

[求助] 【求助】PLGA 纳米粒总是不成球 已有2人参与

各位前辈好,由于我在的实验室之前有做过PLGA纳米粒,但是之前的师兄师姐都毕业了,所以我也一直按照之前实验室的方法来做,但是做了一个学期了,我做的PLGA纳米粒一直都不成球。特来求助。

具体我的方法是:1)称取0.03g PLGA(LA/GA=50/50,Mw30k)和0.3mg香豆素,溶解在3mL二氯甲烷中作为油相;
2)将PVA(Mw 20k~30k)溶于双蒸水中配制成质量分数1%(1 g/100 mL)的溶液,取18mL PVA溶液,与1)中的油相混合,在11000rpm的转速下,用高速匀质机初乳1min,形成的粗分散体系在冰浴条件下,用功率200W的细胞破碎仪进一步超声乳化15min;
3)用减压旋蒸除去二氯甲烷,旋蒸过程不出现大气泡,直到不再有气体逸出,约20~30min。将溶液通过高速离心(18000rpm,20min)得到沉淀,洗涤2~3次,冻干。

除去二氯甲烷的后的乳液透明,通过粒度仪检测粒径在100~200 nm左右,但是通过扫描电镜来看,PLGA根本没有成球。后来怀疑是旋蒸的问题,改用搅拌挥发二氯甲烷,但是结果也是一样。后来用了分子量更高的PVA(105k),终于成球了,但是粒径太大不符合要求。之后用了国外文献上的PVA(30k~70k),还是和最早的结果一样。所以现在我在怀疑是PVA的问题,但是我都是按照文献上和师兄师姐的方法来做的,为什么差别这么大呢?我也不知道是哪出了问题,问老师也不清楚。所以希望求助各位,将问题解决,将实验进行下去。

真的拜托了!
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huangkefcc

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 遗失的生物龙 at 2015-08-21 15:38:42
细胞粉碎仪超声乳化采用多大的功率啊?会不会对蛋白和生长因子的活性产生影响...

超声功率是200w,因为我包裹的材料不是蛋白和生长因子,所以没有考虑超声功率的大小
5楼2015-09-07 16:21:43
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yanfengsong

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
月牙儿的微笑: 请及时对应助进行评价和金币奖励~~ 2015-08-21 19:48:41
huangkefcc(月牙儿的微笑代发): 金币+10, 感谢参与交流~~ 2015-09-08 20:11:25
你制备PLGA纳米粒的初乳为什么要用匀浆机?直接用细胞粉碎仪超声乳化就可以了。这样的粒径在150nm左右。如果你想要粒径更小的,可以采用纳米沉淀法:将PLGA溶解到适量丙酮(可以换位其它)中,将丙酮缓慢滴加到水中,搅拌挥干丙酮即可,这样的粒径在100以下。但肯定都是球形的。
2楼2015-06-15 11:32:02
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huangkefcc

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yanfengsong at 2015-06-15 11:32:02
你制备PLGA纳米粒的初乳为什么要用匀浆机?直接用细胞粉碎仪超声乳化就可以了。这样的粒径在150nm左右。如果你想要粒径更小的,可以采用纳米沉淀法:将PLGA溶解到适量丙酮(可以换位其它)中,将丙酮缓慢滴加到水中 ...

感谢你的回答。用匀浆机主要是为了形成初乳,这样会有利于之后超声乳化。另外我之前也试过用纳米沉淀法,结果发现电镜照片仍然不是球形。所以现在我怀疑是PVA的问题,能问一下你是用的什么PVA吗?
3楼2015-07-08 11:34:31
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遗失的生物龙

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


huangkefcc(月牙儿的微笑代发): 金币+1, 感谢参与交流~~ 2015-09-08 20:11:44
引用回帖:
2楼: Originally posted by yanfengsong at 2015-06-15 11:32:02
你制备PLGA纳米粒的初乳为什么要用匀浆机?直接用细胞粉碎仪超声乳化就可以了。这样的粒径在150nm左右。如果你想要粒径更小的,可以采用纳米沉淀法:将PLGA溶解到适量丙酮(可以换位其它)中,将丙酮缓慢滴加到水中 ...

细胞粉碎仪超声乳化采用多大的功率啊?会不会对蛋白和生长因子的活性产生影响
4楼2015-08-21 15:38:42
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