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自由的柚柚

金虫 (正式写手)

[求助] PLGA缓释微球体外降解是怎么操作的?

体外降解实验是不是每次到取样时间时将上清液除去,将固体烘干称重及其他测试,测试完再加入体外降解液,然后待下一个时间点再重复同样的操作?这样是不是可以和体外释放实验一起做了?或者直接拿空白球去做这个实验?

[ 来自小组 生物材料 ]
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cathican

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

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感谢参与,应助指数 +1
自由的柚柚: 金币+4, ★★★★★最佳答案 2013-09-09 15:34:26
红舟流星: 金币+1, 欢迎来生物材料板块应助交流 2013-09-16 20:48:11
体外释放实验跟降解实验应该是平行的,两组实验所用的基本条件,如微球的浓度、所用缓冲液的种类、所用管的形状等,都应该保持一致。不然,降解组不太能反应释放组的降解情况。
另外,降解组一般按降解实验需要取点的组数来设置实验组。到了预期的降解时间,把样品取出,清洗,干燥,保存,做表征。有些表征还需要在每个时间点设置平行样。
释放与降解实验周期都比较长,实验计划尽量设计好。
2楼2013-09-09 11:38:00
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自由的柚柚

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by cathican at 2013-09-09 11:38:00
体外释放实验跟降解实验应该是平行的,两组实验所用的基本条件,如微球的浓度、所用缓冲液的种类、所用管的形状等,都应该保持一致。不然,降解组不太能反应释放组的降解情况。
另外,降解组一般按降解实验需要取点 ...

谢谢提供帮助。降解实验,到了预期的时间点,将样品取出处理表征后,继续向其中加入降解介质,待下一个时间点再取出、处理、表征?还是说几个时间点就做几个平行,这样的话岂不是要用很多样?应该是前者吧?
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3楼2013-09-09 15:38:26
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liubin

专家顾问 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
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自由的柚柚: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2013-09-09 22:44:28
红舟流星: 金币+1, 专家考核, 欢迎来生物材料板块应助交流 2013-09-16 20:48:18
给你设计个方案仅供参考:

1)模拟体液的种类:水;PBS;DMEM;含10%血清的DMEM
2)样品的重量:50mg
3)取样时间点:第1d;3d;7d;15d;30d;60d;.............
4)在10ml塑料(最好是玻璃)离心管中加入样品50mg;加入模拟体液定容至10ml。取样时离心,收集上清液测PLGA的降解产物;对沉淀称湿重;50度抽风烘干称干重

5)样本数:降解体液的种类 X 平行实验(n大于或等于三) X 取样点数量
4楼2013-09-09 16:35:50
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cathican

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
自由的柚柚: 金币+4, ★★★很有帮助 2013-09-09 22:44:41
引用回帖:
3楼: Originally posted by 自由的柚柚 at 2013-09-09 15:38:26
谢谢提供帮助。降解实验,到了预期的时间点,将样品取出处理表征后,继续向其中加入降解介质,待下一个时间点再取出、处理、表征?还是说几个时间点就做几个平行,这样的话岂不是要用很多样?应该是前者吧?...

样品取出后,如果保存适当的话,降解过程默认为已经停止了。如果干燥完且表征后,样品继续放入溶液中进行降解,那这个操作是不大合理的。样品干燥后再入溶液,得重新吸水溶胀,这个过程已不是连续降解。而且就算你把样品放入溶液,继续降解,这个时候条件(比如样品量,因为表征需要消耗样品)已变。另外,如果这个时间点,你的表征结果做得不够好或者你不满意,你是不存有任何样品的。
所以,尽管后者方案所需要的PLGA比较多,但更合理,操作性更强,是通用方案。
5楼2013-09-09 17:23:50
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