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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 高分子生物材料 » 想观察细胞在材料上生长情况，请问做SEM前需要做哪些准备，怎么制样！？
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lily_get_up

金虫 (初入文坛)

[求助] 想观察细胞在材料上生长情况，请问做SEM前需要做哪些准备，怎么制样！？ 已有1人参与

静电纺材料，然后让细胞在材料上生长，现在想通过SEM观察其增殖情况，但是不知道怎么制样的，应该怎么处理有细胞生长的材料呢，刚开始实验，之前没做过，希望能给些详细的回答，谢谢！！！
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1楼 2015-05-26 10:42:57
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xyvonne

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
lily_get_up: 金币+3, ★有帮助 2015-05-26 17:48:07
我做过细胞生长在金属基体上的SEM，2.5%戊二醛（PBS配）4度固定1h左右，然后乙醇或者异丙醇梯度脱水（20%，40%， 60%， 80%， 95%， 100%， 100%各10min），室温干燥，喷金，SEM。如果效果不好可以考虑梯度脱水后临界点干燥。
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2楼2015-05-26 14:06:02
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lily_get_up

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by xyvonne at 2015-05-26 14:06:02
我做过细胞生长在金属基体上的SEM，2.5%戊二醛（PBS配）4度固定1h左右，然后乙醇或者异丙醇梯度脱水（20%，40%， 60%， 80%， 95%， 100%， 100%各10min），室温干燥，喷金，SEM。如果效果不好可以考虑梯度脱水后临 ...

我做的是静电纺材料纺在盖玻片上的，然后让细胞生长，这个方法同样适用吗？由于没有做过细胞实验，不太懂，麻烦细说~谢谢你啦~
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3楼2015-05-26 17:47:17
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xyvonne

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
lily_get_up: 金币+5, ★★★很有帮助 2015-05-27 15:32:30
引用回帖:
3楼: Originally posted by lily_get_up at 2015-05-26 17:47:17
我做的是静电纺材料纺在盖玻片上的，然后让细胞生长，这个方法同样适用吗？由于没有做过细胞实验，不太懂，麻烦细说~谢谢你啦~...

我觉得虽然基体材料不同，但是考虑的几点是相近的：
1.样品的消毒，我一般用70%乙醇浸泡+紫外照射；
2.你的样品是否会和戊二醛或者乙醇等溶剂发生反应；
3.你的样品梯度脱水过程中和之后的室温干燥时是否会变形，如果会变形需要用临界点干燥。
之前第一次回复的步骤仅能保证细胞能较好的固定和干燥，不能保证你的样品本身不会发生变形等。
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4楼2015-05-26 19:06:41
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lily_get_up

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by xyvonne at 2015-05-26 19:06:41
我觉得虽然基体材料不同，但是考虑的几点是相近的：
1.样品的消毒，我一般用70%乙醇浸泡+紫外照射；
2.你的样品是否会和戊二醛或者乙醇等溶剂发生反应；
3.你的样品梯度脱水过程中和之后的室温干燥时是否会变形 ...

恩恩，算稍微懂了点，再查查相关资料，先做试试，谢啦~
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5楼2015-05-26 20:53:41
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杏子小叶

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by xyvonne at 2015-05-26 14:06:02
我做过细胞生长在金属基体上的SEM，2.5%戊二醛（PBS配）4度固定1h左右，然后乙醇或者异丙醇梯度脱水（20%，40%， 60%， 80%， 95%， 100%， 100%各10min），室温干燥，喷金，SEM。如果效果不好可以考虑梯度脱水后临 ...

请问下戊二醛对细胞生长有影响吗
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6楼2016-06-27 14:20:29
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