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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » HPLC 测定葛根素含量
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1415203896

新虫 (初入文坛)

[求助] HPLC 测定葛根素含量 已有5人参与

HPLC做葛根素含量测定，浓度13.33ug/ml(与药材接近)，一直有前延峰，稀释为6ug/ml依然有，换柱子后依然存在。溶剂为30%的甲醇。流动相为25%的甲醇（30%试过没用），请问该怎么办？

HPLC 测定葛根素含量
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1楼 2015-05-22 17:21:26
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klicking

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
1415203896: 金币+3 2015-09-23 20:23:56
溶剂效应一般导致目标峰扁平，是在进样体积很大的时候会出现。
因此建议改小进样体积后试试看，如果还有，则应该是峰没有分开，或者色谱柱坏掉了。峰没分开则建议使用梯度洗脱，例如，7.5分钟左右的两个峰正好是其异构体；如果是色谱柱坏了则所有峰峰型都会一致。
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归零
8楼2015-05-30 13:50:27
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archbishop

禁虫 (职业作家)

优秀版主
应该是没分开的峰。
我觉得你应该用梯度洗脱。
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雲幕低垂映桂子，江月留白問柳心。
2楼2015-05-22 17:27:39
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wyy080214

实习版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
1415203896: 金币+3, ★有帮助 2015-05-30 11:03:47
更换溶剂就可以解决
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3楼2015-05-22 17:41:36
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lifucheng

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
1415203896: 金币+3, ★有帮助 2015-05-30 11:05:06
您这是混合标品还是单标 如果是混合标品的话 那就没有分开 估计要考虑使用缓冲盐或者换用小粒径的柱子
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4楼2015-05-22 20:15:44
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