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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » HPLC 测定葛根素含量
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1415203896

新虫 (初入文坛)

[求助] HPLC 测定葛根素含量 已有5人参与

HPLC做葛根素含量测定，浓度13.33ug/ml(与药材接近)，一直有前延峰，稀释为6ug/ml依然有，换柱子后依然存在。溶剂为30%的甲醇。流动相为25%的甲醇（30%试过没用），请问该怎么办？

HPLC 测定葛根素含量
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1楼 2015-05-22 17:21:26
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archbishop

禁虫 (职业作家)

优秀版主
应该是没分开的峰。
我觉得你应该用梯度洗脱。
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雲幕低垂映桂子，江月留白問柳心。
2楼2015-05-22 17:27:39
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wyy080214

实习版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
1415203896: 金币+3, ★有帮助 2015-05-30 11:03:47
更换溶剂就可以解决
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3楼2015-05-22 17:41:36
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lifucheng

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
1415203896: 金币+3, ★有帮助 2015-05-30 11:05:06
您这是混合标品还是单标 如果是混合标品的话 那就没有分开 估计要考虑使用缓冲盐或者换用小粒径的柱子
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4楼2015-05-22 20:15:44
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netsking

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
1415203896: 金币+3, ★有帮助 2015-05-30 11:04:50
试一试用甲醇水溶解样品，是什么柱子

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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5楼2015-05-22 21:06:22
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1415203896

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by netsking at 2015-05-22 21:06:22
试一试用甲醇水溶解样品，是什么柱子

C18柱，好像是有残留，
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6楼2015-05-30 10:59:15
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1415203896

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by lifucheng at 2015-05-22 20:15:44
您这是混合标品还是单标 如果是混合标品的话 那就没有分开 估计要考虑使用缓冲盐或者换用小粒径的柱子

不是没有分开。前面就一个物质，浓度太高了，
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7楼2015-05-30 11:00:38
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klicking

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
1415203896: 金币+3 2015-09-23 20:23:56
溶剂效应一般导致目标峰扁平，是在进样体积很大的时候会出现。
因此建议改小进样体积后试试看，如果还有，则应该是峰没有分开，或者色谱柱坏掉了。峰没分开则建议使用梯度洗脱，例如，7.5分钟左右的两个峰正好是其异构体；如果是色谱柱坏了则所有峰峰型都会一致。
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归零
8楼2015-05-30 13:50:27
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netsking

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

两种可能, 1) 浓度太高, 2) Carry on
解决方案: 1) 降低浓度 2) 用20%MeOH水配样品.
另外可以增加保留时间.

还有你用的是什么柱子?不会是1.7mm的UHPLC柱吧?
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9楼2015-05-30 14:26:14
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gzzlzj2015

捐助贵宾 (正式写手)

【答案】应助回帖

按国标做，欢迎测试交流！中科院化学分析测试中心！

[ 发自小木虫客户端 ]
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10楼2015-06-02 02:24:32
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