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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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惰惰228

银虫 (小有名气)

[求助] 提取植物种子中的胆固醇类成分,求指点

最近在提取种子中表达的胆固醇类成分,目标物是22-酮基-26/27羟基胆固醇和藜芦嗪,使用的以下提取步骤:

1.        异丙醇75度预热;
2.        加1.5ml预热的异丙醇至装有种子(约15mg)的玻璃试管中,室温放置15min;
3.        用玻璃棒研磨种子;
4.        加0.75ml氯仿,0.3ml H2O和20ul 100mM标准品内参;
5.        超声10min;
6.        室温震摇1h;
7.        每管涡旋10秒;
8.        1500g离心2min;
9.        将提取物(所有液体)移至新管中;
10.        加2ml氯仿:甲醇(2:1)重复步骤5~9提取一次;
11.    加1ml氯仿:甲醇(2:1)重复步骤5~9提取一次
12.        在装有3次提取物的试管中,加0.5ml  1M KCL;
13.        涡旋,离心,弃上清或小心取出下层溶液至另一新管中;
14.        N2干燥后储存于-20度。

这个方法提取出来,22-酮基-26/27羟基胆固醇含量很低,LCMS分析大概是1.0e5的样子,藜芦嗪暂时没得到,也可能是植物并没有合成。

请教一下,如果想提高含量,该在哪些步骤上进行优化呢?重复提取的两步所加提取液是否合适?
偶不是这个专业的,问题可能有很多菜的地方,见笑。
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