应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 各位，最近刚刚接触绿色荧光蛋白GFP，熟悉GFP蛋白的大神们，请求帮助。
52/1返回列表
查看: 1611  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

去哪里看海

铁虫 (小有名气)

[求助] 各位，最近刚刚接触绿色荧光蛋白GFP，熟悉GFP蛋白的大神们，请求帮助。 已有3人参与

看到了关于GFP蛋白的各种应用，我想用它来做基因表达的定位，大概的思路是这样子的，请大家指教。
从NCBI上面查取GFP序列，用加有合适酶切位点的引物进行PCR扩增片段，连接到质粒，再连上自己要定位的基因，化转到酵母。
目前大致是这么想的，请问这种做法可取吗？GFP基因的模板从哪里买的到？拜托大家了
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2015-05-08 15:46:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

去哪里看海

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by zeroon at 2015-05-12 18:50:45
个人觉得楼主得确定这个GFP在酵母里是否能直接使用，就是说密码子优化过没有。当然，在酵母中用的GPF很常见，ncbi上的序列带的参考文献也会提到该序列是否在酵母中应用的。

另外，细胞内某基因的定位，我估计楼主 ...

对，确实是先连该基因的启动子，再连基因本身，而后是GFP。
赞一下 回复此楼
11楼2015-05-13 16:58:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

caihang

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2015-05-09 12:49:36
没做过酵母，只做过动物细胞。现在很多真核质粒上有GFP基因，另外，不只是GFP，还有其他的一些荧光蛋白，你也可以查查。
赞一下 回复此楼
2楼2015-05-08 22:40:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小小cool

金虫 (正式写手)
我有gfp的模板，可以联系我哈2755157061

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2015-05-09 07:56:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

去哪里看海

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by caihang at 2015-05-08 22:40:06
没做过酵母，只做过动物细胞。现在很多真核质粒上有GFP基因，另外，不只是GFP，还有其他的一些荧光蛋白，你也可以查查。

我找到连有GFP的质粒了，想请问一下，我是不是只要把目的基因和启动子简单连上就可以？我的目的基因是个小亚基。
赞一下 回复此楼
4楼2015-05-09 11:07:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+3 winsaint 2026-08-27 6/300 2026-08-28 01:46 by alongwaytogo
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+5) +11 晴天加油 2026-08-26 12/600 2026-08-28 01:22 by li09465290@
[教师之家] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 XLGfUIdOmEAO 2026-08-27 4/200 2026-08-27 22:26 by 3RAFyYXYSwGS
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 5/250 2026-08-27 20:50 by gdfollow
[教师之家] 导师吐槽：我怎么摊上了这么个极品研究生！ +7 苏东坡二世 2026-08-23 7/350 2026-08-27 18:14 by 瞬息宇宙
[基金申请] 申请删除本帖 +6 lyz123lyz 2026-08-27 7/350 2026-08-27 17:31 by 宁静致远sy
[文学芳草园] 梦想 +3 myrtle 2026-08-26 3/150 2026-08-27 10:01 by angelyueyi
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜？ 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 我不理解！ +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +9 炎黄贵胄 2026-08-22 10/500 2026-08-26 15:40 by semaglutide
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +22 羊腰板 2026-08-21 25/1250 2026-08-26 15:00 by zuocuiping
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件，有关系吗？ +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 国合现在查不到了吗？ +10 chengyan1220 2026-08-24 20/1000 2026-08-26 08:57 by peasantsprig
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候，我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑，不妨来听听这首《基金之外》 +8 scalable 2026-08-24 8/400 2026-08-25 12:52 by jnhyjjm
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
[基金申请] 人气不行了 +11 fansofjerry 2026-08-21 11/550 2026-08-25 11:04 by 孤独的英雄6
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +13 kulium 2026-08-21 16/800 2026-08-24 16:27 by superceng
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧？ +4 哈哈蛤？ 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭