应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 引物设计
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
191/2返回列表12下一页
查看: 1467  |  回复: 18
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

惊叹号

金虫 (正式写手)

[求助] 引物设计 已有1人参与

怎么设计质粒构建引物，如何选择内切酶？
回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

惊叹号

» 猜你喜欢
1楼 2015-05-05 09:37:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

晞朔

金虫 (正式写手)
你可能要具体描述下你要做什么？这个问题，别人都没办法回答，太大了。
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

惊叹号
2楼2015-05-05 10:13:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nemo88

禁虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
惊叹号: 金币+10, ★★★很有帮助 2015-05-05 10:31:28
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2015-05-06 13:07:50
本帖内容被屏蔽
3楼2015-05-05 10:27:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

惊叹号

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by nemo88 at 2015-05-05 10:27:02
质粒构建的 引物跟质粒没有关系  跟你想插入到质粒中的基因片段有关系
具体引物设计看看软件操作说明即可，很简单，不然说也说不清楚
酶切位点先看质粒上的多克隆位点，然后分析自己序列中有没有这些酶切位点，只 ...

哪些情况下设计引物时不需要加酶切位点，是不是那种针对载体的内切酶切出的是平末端？
赞一下 回复此楼
4楼2015-05-05 10:31:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

惊叹号

金虫 (正式写手)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 晞朔 at 2015-05-05 10:13:53
你可能要具体描述下你要做什么？这个问题，别人都没办法回答，太大了。

我需要构建一个HLA-A2.1的质粒，但是对于扩增全长的引物设计没有经验
赞一下 回复此楼
5楼2015-05-05 10:32:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cckk_2000

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
惊叹号: 金币+5, ★有帮助 2015-05-05 10:38:34
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2015-05-06 13:08:02
一、怎么设计质粒？质粒不需要设计，你想插入什么基因的话，需要设计相应的引物，PCR酶切后连接即可。
二、构建引物，这话不合适，引物应该是设计而不是构建。设计引物有很多原则，根据相应文献直接用引物是好办法，不行的话可以用软件设计，完了BLAST一下。
三、如何选择内切酶，根据你选定的质粒选择单一酶切位点，最好是没有星号活性。
赞一下 回复此楼
科研炮灰
6楼2015-05-05 10:33:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

惊叹号

金虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by cckk_2000 at 2015-05-05 10:33:27
一、怎么设计质粒？质粒不需要设计，你想插入什么基因的话，需要设计相应的引物，PCR酶切后连接即可。
二、构建引物，这话不合适，引物应该是设计而不是构建。设计引物有很多原则，根据相应文献直接用引物是好办法 ...

不好意思，可能是输入时失误，应该是设计引物构建质粒，这个一般都是能看懂的。
赞一下 回复此楼
7楼2015-05-05 10:38:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nemo88

禁虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
惊叹号: 金币+15, ★★★很有帮助 2015-05-05 10:59:02
本帖内容被屏蔽

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

惊叹号
8楼2015-05-05 10:46:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

惊叹号

金虫 (正式写手)
送红花一朵
引用回帖:
8楼: Originally posted by nemo88 at 2015-05-05 10:46:29
如果你想PCR完了直接连T载体借助T载体的酶切位点  酶切后转到你想要的质粒上  此时不需要加酶切位点


平末端的建议不要尝试了 ，不好连  后续的筛选工作量也大...

对这种扩增全长的引物设计我没有什么经验，能否传授一点？
赞一下 回复此楼
9楼2015-05-05 10:59:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nemo88

禁虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
惊叹号: 金币+20, ★★★很有帮助, 谢谢 2015-05-05 13:55:44
本帖内容被屏蔽
10楼2015-05-05 11:05:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 惊叹号 的主题更新
191/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 344材料与化工调剂 +5 调剂上岸玘 2026-04-03 5/250 2026-04-03 14:32 by Mistake-J
[考研] 333求调剂 +9 wfh030413@ 2026-04-03 9/450 2026-04-03 14:20 by 啊俊！
[考研] 11408，284分，二战真诚求调剂 +4 12.27 2026-04-02 4/200 2026-04-03 14:14 by dxiaoxin
[考研] 建环，能源，土木老师路过看一看！！！ +5 嘿嘿uu 2026-04-01 5/250 2026-04-03 11:47 by znian
[考研] 265求调剂 +16 林深温澜 2026-04-01 19/950 2026-04-03 11:24 by zhangdingwa
[考研] 考研调剂 +7 不爱喝饮料 2026-04-03 7/350 2026-04-03 11:21 by wangjy2002
[考研] 085801 总分275 本科新能源 求调剂 +19 bradoner 2026-04-01 23/1150 2026-04-03 10:07 by linyelide
[考研] 372分材料与化工（085600）一志愿湖南大学求调剂 +5 蓝笺片 2026-04-02 6/300 2026-04-02 21:37 by dongzh2009
[考研] 085601一志愿北理325分求调剂 +4 找调剂，， 2026-04-02 4/200 2026-04-02 21:29 by dongzh2009
[考研] 285求调剂 +11 AZMK 2026-04-01 11/550 2026-04-01 22:40 by peike
[考研] 298求调剂 +4 什么是胖头鱼 2026-03-30 6/300 2026-04-01 22:06 by 客尔美德
[考研] 环境工程 085701，267求调剂 +15 minht 2026-03-29 16/800 2026-04-01 10:13 by li_sujuan99
[考研] 考研生物与医药调剂 +7 铁憨憨123425 2026-03-31 7/350 2026-04-01 08:45 by JourneyLucky
[考研] 土木304求调剂 +5 顶级擦擦 2026-03-31 5/250 2026-04-01 08:15 by fdcxdystjk￥
[考研] 材料科学与工程求调剂 +13 深V宿舍吧 2026-03-29 13/650 2026-03-31 19:50 by Dyhoer
[考研] 346求调剂 一志愿070303有机化学 +11 萝卜炖青菜 2026-03-28 12/600 2026-03-31 17:54 by xhai2011
[考研] 080500-315分复试调剂 +9 上岸3821 2026-03-31 9/450 2026-03-31 17:29 by 唐沐儿
[考研] 329求调剂，一志愿西北工业大学，材料工程（085601） +6 小小机灵虫 2026-03-29 12/600 2026-03-31 16:58 by 记事本2026
[考研] 086000生物与医药调剂 +5 Feisty。 2026-03-28 9/450 2026-03-29 12:02 by longlotian
[考研] 本科双非材料，跨考一志愿华电085801电气，283求调剂，任何专业都可以 +6 芝士雪baoo 2026-03-28 8/400 2026-03-29 08:16 by 松花缸1201
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭