【答案】应助回帖

11楼2015-05-05 15:26:37

nemo88

禁虫 (小有名气)

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惊叹号: 金币+10 2015-05-05 16:34:40

本帖内容被屏蔽

12楼2015-05-05 15:32:39

18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

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【答案】应助回帖

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附件 1 : 分子生物学专题手册.pdf

2015-05-05 16:01:40, 1.02 M

todayisdifficult，tomorrowismoredifficult，butthedayaftertomorrowisbeautiful

13楼2015-05-05 16:01:58

惊叹号

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引用回帖:

12楼: Originally posted by nemo88 at 2015-05-05 15:32:39
两点
一点是目的基因上不含该酶切位点
第二点是质粒上多克隆位点有这个酶切位点

此外还要注意正反顺序哈...

能不能讲解一下需要怎么注意正反顺序？

14楼2015-05-05 16:34:32

惊叹号

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送红花一朵

大家帮我看一下这对引物设计的合不合理
CDS序列
atggccgtca tggcgccccg aaccctcgtc ctgctactct cgggggctct ggccctgacc cagacctggg cgg gctctca ctccatgagg tatttcttca catccgtgtc ccggcccggc cgcggggagc cccgcttcat cgcagtgggc tacgtggacg acacgcagtt cgtgcggttc gacagcgacg ccgcgagcca gaggatggag ccgcgggcgc cgtggataga gcaggagggt ccggagtatt gggacgggga gacacggaaa gtgaaggccc actcacagac tcaccgagtg gacctgggga ccctgcgcgg ctactacaac cagagcgagg ccg gttctc
acaccgtcca gaggatgtat ggctgcgacg tggggtcgga ctggcgcttc ctccgcgggt accaccagta cgcctacgac ggcaaggatt acatcgccct gaaagaggac ctgcgctctt ggaccgcggc ggacatggca gctcagacca ccaagcacaa gtgggaggcg gcccatgtgg cggagcagtt gagagcctac ctggagggca cgtgcgtgga gtggctccgc agatacctgg agaacgggaa ggagacgctg cagcgcacgg acgcccccaa aacgcatatg actcaccacg ctgtctctga ccatgaagcc accctgaggt gctgggccct gagcttctac cctgcggaga tcacactgac ctggcagcgg gatggggagg accagaccca ggacacggag ctcgtggaga ccaggcctgc aggggatgga accttccaga agtgggcggc tgtggtggtg ccttctggac aggagcagag atacacctgc catgtgcagc atgagggttt gcccaagccc ctcaccctga gatgggagccg tcttcccagc ccaccatccc catcgtgggc atcattgctg gcctggttct ctttggagct gtgatcactg gagctgtggt cgctgctgtg atgtggagga ggaagagctc agatagaaaagg agggagctac tctcaggctg caagcagt gacagtgccc agggctctga tgtgtctctc acagcttgta aagtgtga
载体：EGFP-N2
酶切位点：EcoRI,BamHI
引物序列：
F：5`-CG GAA TTC ATG GCC GTC ATG
R: 5`-CG GGA TCC TCA CAC TTT ACA AGC TG

15楼2015-05-05 21:25:37

ltf329395464

金虫 (初入文坛)

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【答案】应助回帖

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谁说平末端不能用了？瞎说~不要误导人！

ONLY I CAN !

16楼2015-05-06 17:01:59

ltf329395464

金虫 (初入文坛)

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惊叹号: 金币+10, ★★★很有帮助 2015-05-06 17:32:15

引用回帖:

15楼: Originally posted by 惊叹号 at 2015-05-05 21:25:37
大家帮我看一下这对引物设计的合不合理
CDS序列
atggccgtca tggcgccccg aaccctcgtc ctgctactct cgggggctct ggccctgacc cagacctggg cgg gctctca ctccatgagg tatttcttca catccgtgtc ccggcccggc cgcggggagc cccgcttc ...

上游引物有点短了吧。和模版完全相合的才12bp太少了。最好提到17个以上。以保证特异性。