24小时热门版块排行榜    

查看: 2703  |  回复: 4

nvs0558

新虫 (初入文坛)

[求助] 为什么我的内标突然跑不出来了,并且总引起基线的大漂移呢 已有2人参与

我用的是HPLC-UV,从第6~26分钟之间梯度洗脱,总共跑30分钟。分离的是一堆核苷酸(我想定量的有五种,总共含有至少13种)。借用别人的仪器和柱子。
我一个月前试了方法,当时一切OK。
然后我就忙着做其他课题去了;仪器和柱子别人用着。
现在我打算正式开始方法学考证了。用的流动相还是一个月前配的(当时配了4L)
我要测的东西全都好好的,保留时间也都没变。结果内标的纯品(也是一种核苷酸)怎么都出不来峰
可是每次一跑内标,整个基线就从10分钟左右开始往上翘,翘到比正常的标准品的峰高还要高。。

所以,是我的内标出了什么问题吗?还是我的柱子对内标失效?
急求高手解答!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jinianwei

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
流动相放的时间太久了吧。也有可能是你的样品的极性和刚开始摸方法时不一样了。或者少进点试试。仪器,或柱子的问题不太可能。
人生需要努力
2楼2015-05-04 17:21:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nvs0558

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by jinianwei at 2015-05-04 17:21:52
流动相放的时间太久了吧。也有可能是你的样品的极性和刚开始摸方法时不一样了。或者少进点试试。仪器,或柱子的问题不太可能。

所以,流动相究竟可以放多久呢?
理论上,如果是盐溶液或者缓冲液的话,细菌之类的并没有生长环境;化学品也没那么容易降解的。
3楼2015-05-06 13:24:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

易沐

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引用回帖:
3楼: Originally posted by nvs0558 at 2015-05-06 13:24:24
所以,流动相究竟可以放多久呢?
理论上,如果是盐溶液或者缓冲液的话,细菌之类的并没有生长环境;化学品也没那么容易降解的。...

一般最好是现配现用的。盐溶液或者缓冲也不是完全没有细菌生长之类的,更浓度也哟偶关系,还有盐溶液或者缓冲液长时间放置有可能盐析等对柱子不好。
4楼2015-05-06 13:57:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

木子123abc

新虫 (初入文坛)

检测核苷酸你的那个五种核苷酸标准品是从sigma买的么,我在sigma官网上不卖GMP标准品,有GMP.Na2,你用的GMP标准品是哪种 谢谢

发自小木虫IOS客户端
5楼2017-12-28 22:42:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 nvs0558 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的? +16 爱看书的可乐 2026-08-26 18/900 2026-08-28 15:41 by winsaint
[教师之家] 导师吐槽:我怎么摊上了这么个极品研究生! +8 苏东坡二世 2026-08-23 8/400 2026-08-28 14:41 by lkforward
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见(F口面上) +4 gdd2018 2026-08-28 9/450 2026-08-28 14:22 by jklily
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +3 bud_bud 2026-08-27 6/300 2026-08-28 11:53 by bud_bud
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高,自己申请怎么就这么难 +10 Kittylucky 2026-08-27 11/550 2026-08-28 10:45 by Kittylucky
[基金申请] 哪位高人中了,把查询到的截图贴出来让我看看,让我长长见识 +5 yuleib84 2026-08-26 6/300 2026-08-28 00:02 by yudaoqian88
[基金申请] 看板上这么多中的,有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 我不理解! +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +7 process2012 2026-08-23 10/500 2026-08-26 19:23 by hmhminy
[基金申请] 系统查不到 +10 董八千 2026-08-26 10/500 2026-08-26 16:30 by Equinoxhua
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +23 koalala 2026-08-24 26/1300 2026-08-26 14:29 by 宝贝虫子
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 国际合作可查了,中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 国合现在查不到了吗? +10 chengyan1220 2026-08-24 20/1000 2026-08-26 08:57 by peasantsprig
[基金申请] 明天应该可查了!? +6 chengyan1220 2026-08-23 6/300 2026-08-25 19:45 by zfd97
[基金申请] 某些机构,以效率低为荣,以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +13 kulium 2026-08-21 16/800 2026-08-24 16:27 by superceng
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办? +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
信息提示
请填处理意见