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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 为什么我的内标突然跑不出来了，并且总引起基线的大漂移呢
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nvs0558

新虫 (初入文坛)

[求助] 为什么我的内标突然跑不出来了，并且总引起基线的大漂移呢 已有2人参与

我用的是HPLC-UV，从第6~26分钟之间梯度洗脱，总共跑30分钟。分离的是一堆核苷酸（我想定量的有五种，总共含有至少13种）。借用别人的仪器和柱子。
我一个月前试了方法，当时一切OK。
然后我就忙着做其他课题去了；仪器和柱子别人用着。
现在我打算正式开始方法学考证了。用的流动相还是一个月前配的（当时配了4L）
我要测的东西全都好好的，保留时间也都没变。结果内标的纯品（也是一种核苷酸）怎么都出不来峰
可是每次一跑内标，整个基线就从10分钟左右开始往上翘，翘到比正常的标准品的峰高还要高。。

所以，是我的内标出了什么问题吗？还是我的柱子对内标失效？
急求高手解答！
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1楼 2015-05-04 15:24:20
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jinianwei

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
流动相放的时间太久了吧。也有可能是你的样品的极性和刚开始摸方法时不一样了。或者少进点试试。仪器，或柱子的问题不太可能。
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人生需要努力
2楼2015-05-04 17:21:52
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nvs0558

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by jinianwei at 2015-05-04 17:21:52
流动相放的时间太久了吧。也有可能是你的样品的极性和刚开始摸方法时不一样了。或者少进点试试。仪器，或柱子的问题不太可能。

所以，流动相究竟可以放多久呢？
理论上，如果是盐溶液或者缓冲液的话，细菌之类的并没有生长环境；化学品也没那么容易降解的。
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3楼2015-05-06 13:24:24
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易沐

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
3楼: Originally posted by nvs0558 at 2015-05-06 13:24:24
所以，流动相究竟可以放多久呢？
理论上，如果是盐溶液或者缓冲液的话，细菌之类的并没有生长环境；化学品也没那么容易降解的。...

一般最好是现配现用的。盐溶液或者缓冲也不是完全没有细菌生长之类的，更浓度也哟偶关系，还有盐溶液或者缓冲液长时间放置有可能盐析等对柱子不好。
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4楼2015-05-06 13:57:01
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木子123abc

新虫 (初入文坛)
检测核苷酸你的那个五种核苷酸标准品是从sigma买的么，我在sigma官网上不卖GMP标准品，有GMP.Na2，你用的GMP标准品是哪种 谢谢

发自小木虫IOS客户端
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5楼2017-12-28 22:42:20
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