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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 新药研发 » 为何HPLC会始终出现倒峰
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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longer413

金虫 (小有名气)

[交流] 为何HPLC会始终出现倒峰

请问下各位高手！
我做HPLC分析，我进一针溶剂峰，在三分钟都出现杂质峰了，忽然在6分钟出现了一个倒峰，在9分钟时又出现了一个正峰。我也想过是溶剂不干净，但我已经换了很多次了，始终就是这样。
请高手帮忙下！
谢了。。。。。。。。。
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1楼 2008-07-11 10:08:36
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guohuicpu

银虫 (小有名气)
★
karl2100(金币+1,VIP+0):多谢指教！
进样系统脏了，包括进样口、定量环等。还有可能是检测系统里面有气泡，包括柱子以及检测池。使劲冲洗一下即可。
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2楼2008-07-11 10:23:25
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278302519a

金虫 (小有名气)
★ ★
karl2100(金币+1,VIP+0):多谢提供！
tianruibencao(金币+1,VIP+0):3Q
1 如果你的样品是制剂，尤其是注射剂之类的，很容易由于其中引入的辅料而产生倒峰。这种情况是常见的。
建议增加辅料空白试验看一下。
2 另外需要考虑的是，对照品和样品的稀释方法有区别吗？如果是相同溶剂稀释的则无须考虑，如果不同配置方法配置，建议考察溶剂空白。
3 还有一点，水也有倒峰出现，如果是注射液，而且稀释倍数不大，倒峰很正常。
4 另外,多数情况下气泡是不出倒峰的，起泡的峰一般为很对称的馒头峰，而且，出峰时间大多在5分钟以内。

摘自别人的看法，你参考一下吧
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3楼2008-07-11 11:53:34
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longer413

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 278302519a at 2008-7-11 11:53:
1 如果你的样品是制剂，尤其是注射剂之类的，很容易由于其中引入的辅料而产生倒峰。这种情况是常见的。
建议增加辅料空白试验看一下。
2 另外需要考虑的是，对照品和样品的稀释方法有区别吗？如果是相同溶剂稀释 ...

首先先谢谢各位高手指点！
我还没有进样品，进的是溶样品的溶剂
溶剂就是流动相！！！
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4楼2008-07-11 13:19:30
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yujinxiang28

★
tianruibencao(金币+1,VIP+0):3Q
你的溶剂是什么级别的？分析纯还是色谱纯？你的流动相是什么？是等度洗脱还是梯度洗脱，还有你的检测波长又是多少？等等...    可能和多方面有关，你都试着排除一下，也许能找到原因，有时可能会是正常情况！
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5楼2008-07-11 13:36:06
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独孤久健

木虫 (职业作家)
其实这是一个很复杂的问题.原因很多,但是,似乎没有定论
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大其心容天下之物虚其心受天下之善平其心论天下之事潜其心观天下之理定其心应天下之变
6楼2008-07-14 08:50:17
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wsf13176970178

木虫 (正式写手)
★
tianruibencao(金币+1,VIP+0):3Q
应该是分析软件的问题，或色谱仪程序有问题
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7楼2008-07-14 19:45:41
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chenfengpolang

金虫 (著名写手)
★
tianruibencao(金币+1,VIP+0):3Q
吸一点现在在走的流动相试试，不可能产生这种现象，如有则要考虑进样阀污染，或洗针的溶剂。
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乘风破浪，生生不息，衔一枝橄榄，为你带来永远的春天，和你慢慢地变老，幸哉，乐哉！
8楼2008-07-18 09:54:01
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tianxiaochun

实习版主 (知名作家)

聪聪家族之无敌小破孩
★ ★
tianruibencao(金币+2,VIP+0):ok
最好是先能换台仪器试一试~
然后找别人同样做试一试，有时候不一样的人出现峰就不一样~
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我很个性，无需签名！
9楼2008-07-19 22:27:40
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月下蝶

金虫 (正式写手)
★ ★
tianruibencao(金币+1,VIP+0):3Q
xy4585618(金币+1,VIP+0):3q
也有可能是仪器设置的问题，参比波长或者宽带什么的去掉试一下
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10楼2008-07-20 13:30:05
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