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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 新药研发 » 为何HPLC会始终出现倒峰
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longer413

金虫 (小有名气)

[交流] 为何HPLC会始终出现倒峰

请问下各位高手！
我做HPLC分析，我进一针溶剂峰，在三分钟都出现杂质峰了，忽然在6分钟出现了一个倒峰，在9分钟时又出现了一个正峰。我也想过是溶剂不干净，但我已经换了很多次了，始终就是这样。
请高手帮忙下！
谢了。。。。。。。。。
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1楼 2008-07-11 10:08:36
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longer413

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 278302519a at 2008-7-11 11:53:
1 如果你的样品是制剂，尤其是注射剂之类的，很容易由于其中引入的辅料而产生倒峰。这种情况是常见的。
建议增加辅料空白试验看一下。
2 另外需要考虑的是，对照品和样品的稀释方法有区别吗？如果是相同溶剂稀释 ...

首先先谢谢各位高手指点！
我还没有进样品，进的是溶样品的溶剂
溶剂就是流动相！！！
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4楼2008-07-11 13:19:30
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guohuicpu

银虫 (小有名气)
★
karl2100(金币+1,VIP+0):多谢指教！
进样系统脏了，包括进样口、定量环等。还有可能是检测系统里面有气泡，包括柱子以及检测池。使劲冲洗一下即可。
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2楼2008-07-11 10:23:25
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278302519a

金虫 (小有名气)
★ ★
karl2100(金币+1,VIP+0):多谢提供！
tianruibencao(金币+1,VIP+0):3Q
1 如果你的样品是制剂，尤其是注射剂之类的，很容易由于其中引入的辅料而产生倒峰。这种情况是常见的。
建议增加辅料空白试验看一下。
2 另外需要考虑的是，对照品和样品的稀释方法有区别吗？如果是相同溶剂稀释的则无须考虑，如果不同配置方法配置，建议考察溶剂空白。
3 还有一点，水也有倒峰出现，如果是注射液，而且稀释倍数不大，倒峰很正常。
4 另外,多数情况下气泡是不出倒峰的，起泡的峰一般为很对称的馒头峰，而且，出峰时间大多在5分钟以内。

摘自别人的看法，你参考一下吧
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3楼2008-07-11 11:53:34
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yujinxiang28

★
tianruibencao(金币+1,VIP+0):3Q
你的溶剂是什么级别的？分析纯还是色谱纯？你的流动相是什么？是等度洗脱还是梯度洗脱，还有你的检测波长又是多少？等等...    可能和多方面有关，你都试着排除一下，也许能找到原因，有时可能会是正常情况！
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5楼2008-07-11 13:36:06
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