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yixinyiyiai

新虫 (初入文坛)

[求助] 液相色谱条件中波长怎么选择? 已有8人参与

我现在在试题建立一个复杂组分的液相色谱条件,做了紫外吸收波长扫描,显示只在235nm处有个波峰,试着用含0.5%冰醋酸的水溶液-甲醇(9:1)作为流动相,PDA检测器。结果显示在235处相应的确最大,但是峰分离不好,在其他波长下,比如264,峰分离的稍微好些。请问,我该怎么确定波长呢?要综合考虑哪些方面?是我必须先找到合适的条件,先把峰分开,再考虑确定波长吗?
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高效液相色谱

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265715cf

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
峰分离的好坏跟波长没有关系,跟流动相和洗脱程序有关。我现在就在做高效液相色谱与荧光检测器联用检测植物激素,前期将峰分开花了好长时间,主要就是调洗脱程序。

[ 发自小木虫客户端 ]
never give up
9楼2015-05-02 21:56:45
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查看全部 11 个回答

archbishop

禁虫 (职业作家)

优秀版主

我觉得你应该选多个波长。波长本身并不会影响分离,是因为不同的物质在不同波长下响应不同。
雲幕低垂映桂子,江月留白問柳心。
2楼2015-04-30 13:32:57
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散尽天财

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
个人觉得先确定吸收波长,至于峰能不能分开跟波长没关系,这个跟柱的极性、流动相配比、流动相PH值及流速(影响不太大)有关。
3楼2015-05-01 18:00:09
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赈早见琥珀主

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
分离和波长没有必然联系,如果选高波长但是某些杂质没有显示出来就得不偿失了。建议你还是从色谱柱,流动相等方面改善分离度比较好。
铁甲依然在
4楼2015-05-01 19:27:57
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