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Ustar

禁虫 (小有名气)

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hkj710

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
Ustar: 金币+5, ★★★很有帮助 2015-04-26 14:34:01
这个蛋白大小属于中间大小,我一般一块10-12%胶100V,一个小时,基本上指示剂到尾部,转膜的话,湿转也是100V,大概300mA,一个小时,绝大部分蛋白都能转印到膜上。只是要注意降温,不要温度太高就可以了
2楼2015-04-25 00:42:13
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xh0421

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
Gel running
10% Bio-rad pre-casting gel, 200volts all the way, 40-45min.
or
Hand-casting gel, 4% stacking, 12% resolving, 80volts when in stacking(10-15 min), change to 200volts when you see bromophenol blue in resolving gel (35-40 min). You can get the band as straight as drawing with a ruler.

Transfer
200 volts, 2 hr, 4 degree.
or 80 volts, overnight, 4 degree.

I used to do a lot of WB for a protein at 83kD, if you need, I can send you my protocol.

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

3楼2015-04-25 01:43:56
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Ustar

禁虫 (小有名气)

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4楼2015-04-26 14:34:14
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Ustar

禁虫 (小有名气)

送红花一朵
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5楼2015-04-26 14:34:48
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fwyou

银虫 (正式写手)

学习了,其实wb不是很难啊
comeon
6楼2015-04-26 15:45:37
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linyingjia

至尊木虫 (职业作家)

12%     湿转  恒流 80mA   2h
7楼2015-04-26 20:39:01
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相忘于少年

木虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by xh0421 at 2015-04-25 01:43:56
Gel running
10% Bio-rad pre-casting gel, 200volts all the way, 40-45min.
or
Hand-casting gel, 4% stacking, 12% resolving, 80volts when in stacking(10-15 min), change to 200volts when you see brom ...

浓缩胶的配比你可说说吗?谢谢!

[ 发自小木虫客户端 ]
修和无人见,存心有天知。
8楼2015-04-26 23:18:53
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Ustar

禁虫 (小有名气)

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9楼2015-04-27 08:30:37
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Ustar

禁虫 (小有名气)

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10楼2015-04-27 08:36:08
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