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cashq

铁虫 (初入文坛)

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[交流] 快速破碎大量酵母

好些天前就有虫友在问我破碎酵母的方法，也就今天才终于有空整理一下分享给大家（T口T忙成狗）~一直觉得自己破碎酵母的方法很普通（我们实验室的人都是这么做的→_→）也没想到网上居然还没什么人知道这个这么好用的方法。。。
其他方法破碎酵母都是有各种各样的缺陷~大家懂的
不罗嗦，看招

装备主要就是破碎珠+多样品组织研磨机
这个方法适用于破碎样品量多的情况~如果你的样品是很难破碎的，比如真菌之类的，那就更应该用这个方法了╮(╯▽╰)╭有前人指路就是这么爽~

说到多样品组织研磨机，这是个神器。。因为听说这个机子一般都是用来破碎动植物细胞的。。不知道是哪个师兄师姐开创了破碎酵母的先例，这个方法就这么诞生了~（好吧，我能说是我们实验室穷去借了人家的机子用么T口T）有钱没钱的入手个国产的也足够了~我们用的就是国产的，效果也是杠杠的~

实验准备：
1. 破碎珠酸洗处理；
2. 预处理好的研磨管（我用的是2ml的EP管）；
3. 冷冻好装EP管的模块（这个是跟多样品组织研磨机配套的，我是把模块放到液氮里浸泡~）；
4. 试剂（PBS或trizol或其它buffer，根据实验目的定。我用的PBS~）
实验步骤：
1. 取酵母菌离心去上清；
2. 加入破碎珠和PBS溶液，将EP管放入冷冻好的模块中；
3. 模块放入研磨机中振荡（振荡参数根据不同的多样品组织研磨机和酵母菌多少而定，我用的是上海净信的机子，国产机~╮(╯▽╰)╭性价比相当高了）
4. 离心取上清，检测目的成分含量（酵母破碎程度），回收破碎珠。
注意事项：如果没有冷冻模块的话，振荡要每分钟都停歇一会儿，防止升温

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