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[交流]
快速破碎大量酵母
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好些天前就有虫友在问我破碎酵母的方法,也就今天才终于有空整理一下分享给大家(T口T忙成狗)~一直觉得自己破碎酵母的方法很普通(我们实验室的人都是这么做的→_→)也没想到网上居然还没什么人知道这个这么好用的方法。。。 其他方法破碎酵母都是有各种各样的缺陷~大家懂的 不罗嗦,看招 装备主要就是破碎珠+多样品组织研磨机 这个方法适用于破碎样品量多的情况~如果你的样品是很难破碎的,比如真菌之类的,那就更应该用这个方法了╮(╯▽╰)╭有前人指路就是这么爽~ 说到多样品组织研磨机,这是个神器。。因为听说这个机子一般都是用来破碎动植物细胞的。。不知道是哪个师兄师姐开创了破碎酵母的先例,这个方法就这么诞生了~(好吧,我能说是我们实验室穷去借了人家的机子用么T口T)有钱没钱的入手个国产的也足够了~我们用的就是国产的,效果也是杠杠的~ 实验准备: 1. 破碎珠酸洗处理; 2. 预处理好的研磨管(我用的是2ml的EP管); 3. 冷冻好装EP管的模块(这个是跟多样品组织研磨机配套的,我是把模块放到液氮里浸泡~); 4. 试剂(PBS或trizol或其它buffer,根据实验目的定。我用的PBS~) 实验步骤: 1. 取酵母菌离心去上清; 2. 加入破碎珠和PBS溶液,将EP管放入冷冻好的模块中; 3. 模块放入研磨机中振荡(振荡参数根据不同的多样品组织研磨机和酵母菌多少而定,我用的是上海净信的机子,国产机~╮(╯▽╰)╭性价比相当高了) 4. 离心取上清,检测目的成分含量(酵母破碎程度),回收破碎珠。 注意事项:如果没有冷冻模块的话,振荡要每分钟都停歇一会儿,防止升温 |
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