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cashq

铁虫 (初入文坛)


[交流] 快速破碎大量酵母

好些天前就有虫友在问我破碎酵母的方法,也就今天才终于有空整理一下分享给大家(T口T忙成狗)~一直觉得自己破碎酵母的方法很普通(我们实验室的人都是这么做的→_→)也没想到网上居然还没什么人知道这个这么好用的方法。。。
其他方法破碎酵母都是有各种各样的缺陷~大家懂的
不罗嗦,看招

装备主要就是破碎珠+多样品组织研磨机
这个方法适用于破碎样品量多的情况~如果你的样品是很难破碎的,比如真菌之类的,那就更应该用这个方法了╮(╯▽╰)╭有前人指路就是这么爽~

说到多样品组织研磨机,这是个神器。。因为听说这个机子一般都是用来破碎动植物细胞的。。不知道是哪个师兄师姐开创了破碎酵母的先例,这个方法就这么诞生了~(好吧,我能说是我们实验室穷去借了人家的机子用么T口T)有钱没钱的入手个国产的也足够了~我们用的就是国产的,效果也是杠杠的~

实验准备:
1.        破碎珠酸洗处理;
2.        预处理好的研磨管(我用的是2ml的EP管);
3.        冷冻好装EP管的模块(这个是跟多样品组织研磨机配套的,我是把模块放到液氮里浸泡~);
4.        试剂(PBS或trizol或其它buffer,根据实验目的定。我用的PBS~)
实验步骤:
1.        取酵母菌离心去上清;
2.        加入破碎珠和PBS溶液,将EP管放入冷冻好的模块中;
3.        模块放入研磨机中振荡(振荡参数根据不同的多样品组织研磨机和酵母菌多少而定,我用的是上海净信的机子,国产机~╮(╯▽╰)╭性价比相当高了)
4.        离心取上清,检测目的成分含量(酵母破碎程度),回收破碎珠。
注意事项:如果没有冷冻模块的话,振荡要每分钟都停歇一会儿,防止升温
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yigeerliu

银虫 (小有名气)


7楼2015-04-26 10:51:04
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suninghao

新虫 (初入文坛)


★
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估计你没用过广州聚能的细胞破碎机吧,那个也是国产的,破碎效果非常好,基本上破碎一两遍就好了,破碎率达百分之九十多
8楼2016-01-22 15:46:17
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suninghao

新虫 (初入文坛)


★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
估计你没用过广州聚能的细胞破碎机吧,那个也是国产的,破碎效果非常好,尤其是破碎酵母菌和大肠杆菌,基本上一两遍效果就很好,破碎率达百分之九十多,关键是低温,不影响活性
9楼2016-01-22 15:49:30
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dmbb2楼
2015-04-24 17:57   回复  
cashq(金币+1): 谢谢参与
2015-04-24 18:01   回复  
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2015-04-24 18:01   回复  
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xiejf5楼
2015-04-24 18:01   回复  
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一
mtw9226楼
2015-04-24 18:07   回复  
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