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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 关于OD值的测定的问题
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scofield111

银虫 (正式写手)

[求助] 关于OD值的测定的问题 已有1人参与

我养的酵母，要测其生长曲线，测OD值，每个摇瓶就20ml-25ml，我若要测不同浓度酸浓度生长曲线，作平行，每个浓度三个瓶，每次测OD值都取点，我要测6次，那不是每次取完，瓶内就少一点培养基，体系就不一样了，若是每个浓度18个瓶的话，第一个时间段测浓度1第一组，第二个时间段测同浓度第二组，这第二组和第一组虽然条件一样，但不能这样做吧，我是新手，，求解决办法，谢谢你们，再一点说在测OD值时还要稀释，为什么？ 稀释了，不就不再是原来的OD
值了，
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1楼 2015-04-19 21:37:09
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wbiebei

新虫 (正式写手)
你每次少取一点稀释后测

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2楼2015-04-20 00:14:26
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wanglei512

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
scofield111: 金币+5, ★★★很有帮助, 可惜只能到5 2015-04-20 10:44:25
配培养基的时候配一大瓶，然后用量筒或移液器量取同样的体积于相同规格的摇瓶中，接种一样的量，每个浓度三个平行，如果在6个时间点测定，就应该是18瓶，每个时间点的三瓶测完就扔了。如果你不想这样做，每次取了多少，就用相同体积的无菌培养基补充。测OD值时稀释是因为，分光光度计最大只能测到3，一般要求OD值不要超过1，所以要稀释，稀释的时候应该成倍稀释，用稀释的倍数和测定的OD计算原来的OD。
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scofield111
3楼2015-04-20 08:55:33
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wbiebei

新虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by scofield111 at 2015-04-20 10:41:31
请问具体稀释多少倍，怎么依据，谢谢...

你随便拿样试下，正常在0.1-1范围内可以用！你如果测出是1.5左右那就五倍

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7楼2015-04-21 00:16:50
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wanglei512

金虫 (正式写手)
引用回帖:
10楼: Originally posted by scofield111 at 2015-04-21 20:06:12
请问，我把培养基和菌种同时稀释六倍的话，这时候测得的OD值是否还要乘以6...

空白就是原来一大瓶里剩的无菌培养基，不能稀释。培养的菌液用无菌培养基稀释就可以了。你先去菌液测OD，如果很高就稀释，没超出范围就别稀释，直接测定。如果不清楚如何计算，你用溶质/溶液计算浓度。假定菌液的初始OD值就是它的浓度，设为X；从原菌液中取1ml定容到10ml，就是稀释了10倍，那么现在的浓度或OD值Y=1ml*X/10ml=x/10. 稀释后测出的OD Y=0.585，那么原来的菌液OD值X=0.585*10
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12楼2015-04-29 09:22:56
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scofield111

银虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wbiebei at 2015-04-20 00:14:26
你每次少取一点稀释后测

请问具体稀释多少倍，怎么依据，谢谢
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4楼2015-04-20 10:41:31
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scofield111

银虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by wanglei512 at 2015-04-20 08:55:33
配培养基的时候配一大瓶，然后用量筒或移液器量取同样的体积于相同规格的摇瓶中，接种一样的量，每个浓度三个平行，如果在6个时间点测定，就应该是18瓶，每个时间点的三瓶测完就扔了。如果你不想这样做，每次取了多 ...

感谢，感谢，十分感谢，向你学习
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5楼2015-04-20 10:44:02
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scofield111

银虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by wanglei512 at 2015-04-20 08:55:33
配培养基的时候配一大瓶，然后用量筒或移液器量取同样的体积于相同规格的摇瓶中，接种一样的量，每个浓度三个平行，如果在6个时间点测定，就应该是18瓶，每个时间点的三瓶测完就扔了。如果你不想这样做，每次取了多 ...

原来的OD值 是稀释的倍数和现在测得的OD值直接相乘么
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6楼2015-04-20 10:52:49
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scofield111

银虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by wbiebei at 2015-04-21 00:16:50
你随便拿样试下，正常在0.1-1范围内可以用！你如果测出是1.5左右那就五倍
...

嗯嗯，谢谢，

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8楼2015-04-21 07:43:08
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scofield111

银虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by wbiebei at 2015-04-21 00:16:50
你随便拿样试下，正常在0.1-1范围内可以用！你如果测出是1.5左右那就五倍
...

是这样，我把培养基做空白，稀释了6倍，菌液也稀释了六倍，我想问这样测出来的OD值，还是否要乘以6，还是已经就得到了OD值
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9楼2015-04-21 20:01:56
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scofield111

银虫 (正式写手)
送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by wanglei512 at 2015-04-20 08:55:33
配培养基的时候配一大瓶，然后用量筒或移液器量取同样的体积于相同规格的摇瓶中，接种一样的量，每个浓度三个平行，如果在6个时间点测定，就应该是18瓶，每个时间点的三瓶测完就扔了。如果你不想这样做，每次取了多 ...

请问，我把培养基和菌种同时稀释六倍的话，这时候测得的OD值是否还要乘以6
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10楼2015-04-21 20:06:12
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