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scofield111

银虫 (正式写手)

[求助] 关于OD值的测定的问题 已有1人参与

我养的酵母,要测其生长曲线,测OD值,每个摇瓶就20ml-25ml,我若要测不同浓度酸浓度生长曲线,作平行,每个浓度三个瓶,每次测OD值都取点,我要测6次,那不是每次取完,瓶内就少一点培养基,体系就不一样了,若是每个浓度18个瓶的话,第一个时间段测浓度1第一组,第二个时间段测同浓度第二组,这第二组和第一组虽然条件一样,但不能这样做吧,我是新手,,求解决办法,谢谢你们,再一点说在测OD值时还要稀释,为什么? 稀释了,不就不再是原来的OD
值了,
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wbiebei

新虫 (正式写手)

你每次少取一点稀释后测

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2015-04-20 00:14:26
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wanglei512

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
scofield111: 金币+5, ★★★很有帮助, 可惜只能到5 2015-04-20 10:44:25
配培养基的时候配一大瓶,然后用量筒或移液器量取同样的体积于相同规格的摇瓶中,接种一样的量,每个浓度三个平行,如果在6个时间点测定,就应该是18瓶,每个时间点的三瓶测完就扔了。如果你不想这样做,每次取了多少,就用相同体积的无菌培养基补充。测OD值时稀释是因为,分光光度计最大只能测到3,一般要求OD值不要超过1,所以要稀释,稀释的时候应该成倍稀释,用稀释的倍数和测定的OD计算原来的OD。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

3楼2015-04-20 08:55:33
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wbiebei

新虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by scofield111 at 2015-04-20 10:41:31
请问具体稀释多少倍,怎么依据,谢谢...

你随便拿样试下,正常在0.1-1范围内可以用!你如果测出是1.5左右那就五倍

[ 发自小木虫客户端 ]
7楼2015-04-21 00:16:50
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wanglei512

金虫 (正式写手)

引用回帖:
10楼: Originally posted by scofield111 at 2015-04-21 20:06:12
请问,我把培养基和菌种同时稀释六倍的话,这时候测得的OD值是否还要乘以6...

空白就是原来一大瓶里剩的无菌培养基,不能稀释。培养的菌液用无菌培养基稀释就可以了。你先去菌液测OD,如果很高就稀释,没超出范围就别稀释,直接测定。如果不清楚如何计算,你用溶质/溶液计算浓度。假定菌液的初始OD值就是它的浓度,设为X;从原菌液中取1ml定容到10ml,就是稀释了10倍,那么现在的浓度或OD值Y=1ml*X/10ml=x/10. 稀释后测出的OD Y=0.585,那么原来的菌液OD值X=0.585*10
12楼2015-04-29 09:22:56
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scofield111

银虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by wbiebei at 2015-04-20 00:14:26
你每次少取一点稀释后测

请问具体稀释多少倍,怎么依据,谢谢
4楼2015-04-20 10:41:31
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scofield111

银虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by wanglei512 at 2015-04-20 08:55:33
配培养基的时候配一大瓶,然后用量筒或移液器量取同样的体积于相同规格的摇瓶中,接种一样的量,每个浓度三个平行,如果在6个时间点测定,就应该是18瓶,每个时间点的三瓶测完就扔了。如果你不想这样做,每次取了多 ...

感谢,感谢,十分感谢,向你学习
5楼2015-04-20 10:44:02
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scofield111

银虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by wanglei512 at 2015-04-20 08:55:33
配培养基的时候配一大瓶,然后用量筒或移液器量取同样的体积于相同规格的摇瓶中,接种一样的量,每个浓度三个平行,如果在6个时间点测定,就应该是18瓶,每个时间点的三瓶测完就扔了。如果你不想这样做,每次取了多 ...

原来的OD值 是稀释的倍数和现在测得的OD值直接相乘么
6楼2015-04-20 10:52:49
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scofield111

银虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by wbiebei at 2015-04-21 00:16:50
你随便拿样试下,正常在0.1-1范围内可以用!你如果测出是1.5左右那就五倍
...

嗯嗯,谢谢,

[ 发自小木虫客户端 ]
8楼2015-04-21 07:43:08
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scofield111

银虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by wbiebei at 2015-04-21 00:16:50
你随便拿样试下,正常在0.1-1范围内可以用!你如果测出是1.5左右那就五倍
...

是这样,我把培养基做空白,稀释了6倍,菌液也稀释了六倍,我想问这样测出来的OD值,还是否要乘以6,还是已经就得到了OD值
9楼2015-04-21 20:01:56
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scofield111

银虫 (正式写手)

送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by wanglei512 at 2015-04-20 08:55:33
配培养基的时候配一大瓶,然后用量筒或移液器量取同样的体积于相同规格的摇瓶中,接种一样的量,每个浓度三个平行,如果在6个时间点测定,就应该是18瓶,每个时间点的三瓶测完就扔了。如果你不想这样做,每次取了多 ...

请问,我把培养基和菌种同时稀释六倍的话,这时候测得的OD值是否还要乘以6
10楼2015-04-21 20:06:12
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