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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 是否有定义OD值的标准溶液？
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雯子027

金虫 (小有名气)

[求助] 是否有定义OD值的标准溶液？

在其他帖子上看到对OD的定义：检测单位用OD值表示， OD是optical density（光密度）的缩写，表示被检测物吸收掉的光密度， OD＝1og（1／trans），其中trans为检测物的透光值。

同样的一份菌体溶液，用不同的仪器测量OD600，得到的值是会有偏差的。但是最近我碰到相差两倍的情况，0.3和0.6。乘以稀释率之后，同样一份的菌液，OD值一个3一个6，差了3个OD，这“误差”无法接受。所以想请问下大家，上面定义里的检测物有没有一个标准物呢？换句话说，有没有一种溶液，在同样的波长下的吸光度值基本保持稳定而跟仪器没有太大关系？
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1楼 2013-05-05 20:13:28
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匿名

用户注销 (知名作家)
★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
雯子027: 金币+1 2013-05-05 23:03:42
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励应助！ 2013-05-07 20:33:58
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2楼2013-05-05 22:15:27
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雯子027

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by shangyukuan at 2013-05-05 22:15:27
雯雯呀，真不知道你是遇到了什么情况，同样的一份菌体溶液，用不同的仪器测量OD600，貌似出了一起临时罢工之外真没什么意义，从“同样的一份菌体溶液，用不同的仪器测量OD600 “说明你知道你这同样的一份菌体溶液在 ...

我不是闲着无聊用两个仪器去测OD，但是现在我确实有需要找出两台仪器之间的系统差有多大。菌液的OD太难控制，测出来也不知道哪个准一些。我想是不是有什么标准溶液可以让我用来粗略定量下系统差？
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3楼2013-05-05 23:03:31
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匿名

用户注销 (知名作家)
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4楼2013-05-05 23:06:57
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雯子027

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by shangyukuan at 2013-05-05 23:06:57
按你的这说法貌似不用菌液吧，空气，空比色皿，比色皿加纯水，比色皿加培养基，试试先...

是这样的，两台仪器，有一台是Quawell超微量分光光度计，不需要比色皿，测水的话，水本身的吸光度就小，很难判断是不是仪器本身的误差。
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5楼2013-05-06 09:25:24
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雯子027

金虫 (小有名气)
好吧我决定用一种稳定的化学溶液去测OD对比看看。
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6楼2013-05-06 09:40:07
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shunzhifulin

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
雯子027: 金币+5, ★有帮助 2013-05-06 20:46:56
zhang8826857: 金币+1, 鼓励回帖 2013-05-10 16:32:35
菌浓测定其实不是直接拿发酵液测OD的。准确的做法是测细胞干重，以及发酵液离心沉淀重悬OD，做出标准曲线。这样以后可以用发酵液离心沉淀重悬所测的OD计算出细胞干重，拿发酵液直接测是一种偷工减料的方法，不过也可以仿照上述做标曲，文献中也是常见的。
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7楼2013-05-06 16:50:04
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雯子027

金虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by shunzhifulin at 2013-05-06 16:50:04
菌浓测定其实不是直接拿发酵液测OD的。准确的做法是测细胞干重，以及发酵液离心沉淀重悬OD，做出标准曲线。这样以后可以用发酵液离心沉淀重悬所测的OD计算出细胞干重，拿发酵液直接测是一种偷工减料的方法，不过也可 ...

对的，菌液浓度是本质，但是我测OD并不是要知道菌液浓度，只是参考OD值评估细菌的生长状况。而且现在问题在于两台仪器所测值相差太大，我需要找出原因。

非常感谢您的回答，我从中也学习到了。
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8楼2013-05-06 20:46:41
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ckenter

铁虫 (小有名气)
★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+1, 应助指数-1, 鼓励新虫交流！注意在应助回复时再点确定应助，此回复不算应助。谢谢合作！ 2013-05-08 09:34:33
我也想测定OD值 但是我一直都没搞懂是啥玩意儿啊？起什么作用哦  我是最小菜的小菜
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9楼2013-05-07 16:55:30
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雯子027

金虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by ckenter at 2013-05-07 16:55:30
我也想测定OD值 但是我一直都没搞懂是啥玩意儿啊？起什么作用哦  我是最小菜的小菜

我觉得最基本的问题还是要靠自己去学习比较好，遇到困难了再请求帮助。小木虫里的资源很丰富，可以多看看
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10楼2013-05-08 20:16:51
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