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雯子027

金虫 (小有名气)

[求助] 是否有定义OD值的标准溶液?

在其他帖子上看到对OD的定义:检测单位用OD值表示, OD是optical density(光密度)的缩写,表示被检测物吸收掉的光密度, OD=1og(1/trans),其中trans为检测物的透光值。

同样的一份菌体溶液,用不同的仪器测量OD600,得到的值是会有偏差的。但是最近我碰到相差两倍的情况,0.3和0.6。乘以稀释率之后,同样一份的菌液,OD值一个3一个6,差了3个OD,这“误差”无法接受。所以想请问下大家,上面定义里的检测物有没有一个标准物呢?换句话说,有没有一种溶液,在同样的波长下的吸光度值基本保持稳定而跟仪器没有太大关系?
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匿名

用户注销 (知名作家)

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雯子027: 金币+1 2013-05-05 23:03:42
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励应助! 2013-05-07 20:33:58
本帖仅楼主可见
2楼2013-05-05 22:15:27
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雯子027

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by shangyukuan at 2013-05-05 22:15:27
雯雯呀,真不知道你是遇到了什么情况,同样的一份菌体溶液,用不同的仪器测量OD600,貌似出了一起临时罢工之外真没什么意义,从“同样的一份菌体溶液,用不同的仪器测量OD600 “说明你知道你这同样的一份菌体溶液在 ...

我不是闲着无聊用两个仪器去测OD,但是现在我确实有需要找出两台仪器之间的系统差有多大。菌液的OD太难控制,测出来也不知道哪个准一些。我想是不是有什么标准溶液可以让我用来粗略定量下系统差?
3楼2013-05-05 23:03:31
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匿名

用户注销 (知名作家)

本帖仅楼主可见
4楼2013-05-05 23:06:57
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雯子027

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by shangyukuan at 2013-05-05 23:06:57
按你的这说法貌似不用菌液吧,空气,空比色皿,比色皿加纯水,比色皿加培养基,试试先...

是这样的,两台仪器,有一台是Quawell超微量分光光度计,不需要比色皿,测水的话,水本身的吸光度就小,很难判断是不是仪器本身的误差。
5楼2013-05-06 09:25:24
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雯子027

金虫 (小有名气)

好吧我决定用一种稳定的化学溶液去测OD对比看看。
6楼2013-05-06 09:40:07
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shunzhifulin

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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雯子027: 金币+5, 有帮助 2013-05-06 20:46:56
zhang8826857: 金币+1, 鼓励回帖 2013-05-10 16:32:35
菌浓测定其实不是直接拿发酵液测OD的。准确的做法是测细胞干重,以及发酵液离心沉淀重悬OD,做出标准曲线。这样以后可以用发酵液离心沉淀重悬所测的OD计算出细胞干重,拿发酵液直接测是一种偷工减料的方法,不过也可以仿照上述做标曲,文献中也是常见的。
7楼2013-05-06 16:50:04
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雯子027

金虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by shunzhifulin at 2013-05-06 16:50:04
菌浓测定其实不是直接拿发酵液测OD的。准确的做法是测细胞干重,以及发酵液离心沉淀重悬OD,做出标准曲线。这样以后可以用发酵液离心沉淀重悬所测的OD计算出细胞干重,拿发酵液直接测是一种偷工减料的方法,不过也可 ...

对的,菌液浓度是本质,但是我测OD并不是要知道菌液浓度,只是参考OD值评估细菌的生长状况。而且现在问题在于两台仪器所测值相差太大,我需要找出原因。

非常感谢您的回答,我从中也学习到了。
8楼2013-05-06 20:46:41
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ckenter

铁虫 (小有名气)


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laozuzunzhe: 金币+1, 应助指数-1, 鼓励新虫交流!注意在应助回复时再点确定应助,此回复不算应助。谢谢合作! 2013-05-08 09:34:33
我也想测定OD值 但是我一直都没搞懂是啥玩意儿啊?起什么作用哦  我是最小菜的小菜
9楼2013-05-07 16:55:30
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雯子027

金虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by ckenter at 2013-05-07 16:55:30
我也想测定OD值 但是我一直都没搞懂是啥玩意儿啊?起什么作用哦  我是最小菜的小菜

我觉得最基本的问题还是要靠自己去学习比较好,遇到困难了再请求帮助。小木虫里的资源很丰富,可以多看看
10楼2013-05-08 20:16:51
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